小發(fā)夾RNA沉默COX-2對(duì)HSC-T6細(xì)胞增殖及相關(guān)基因的影響.pdf

1、目的：研究小發(fā)夾RNA沉默COX-2對(duì)HSC-T6細(xì)胞增殖及相關(guān)基因表達(dá)的影響。
　　方法：
　　1、實(shí)驗(yàn)分為空白細(xì)胞組、HK質(zhì)粒對(duì)照組、COX-2 shRNA1組。
　　2、將已構(gòu)建的pYr-1.1-hU6-EGFP-COX-2 shRNA1轉(zhuǎn)染大鼠肝星狀細(xì)胞HSC-T6細(xì)胞株，熒光顯微鏡觀察其轉(zhuǎn)染效率。
　　3、MTT比色檢測(cè)HSC-T6增殖。
　　4、北京博奧生物有限公司的27K Rat Genome

2、 Array芯片掃描觀察HK質(zhì)粒對(duì)照組、COX-2 shRNA1組基因差異表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、COX-2 shRNA1轉(zhuǎn)染大鼠HSC后24h、48h、72h，熒光顯微鏡下細(xì)胞中的細(xì)胞質(zhì)可見綠色的熒光，轉(zhuǎn)染效率均可達(dá)70％以上。
　　2、MTT實(shí)驗(yàn)測(cè)出的OD490光吸收值及繪制的生長(zhǎng)曲線顯示COX-2 shRN1轉(zhuǎn)染組3個(gè)時(shí)間段A值相互之間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，72h轉(zhuǎn)染組與HK質(zhì)粒對(duì)照組及空白組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3、>　　3、在pYr-1.1-hU6-EGFP-COX-2 shRNA1轉(zhuǎn)染HSC-T6后的48h和72h所檢測(cè)到的與增殖有關(guān)差異表達(dá)的基因有8個(gè)，分別是Trp53，Il6，Cxcl10，Atf3，Cdc27，Csf2，Dusp1，Serpinb2。
　　結(jié)論：
　　1、COX-2 shRNA1可抑制HSC-T6細(xì)胞的增殖。
　　2、COX-2 shRNA1對(duì) HSC-T6細(xì)胞增殖抑制作用可能與增殖相關(guān)基因Trp53，I