聲造影評(píng)估大鼠單側(cè)上尿路梗阻腎灌注改變.pdf

1、目的：探討超聲造影（Contrast-enhancedultrasounography，CEUS）技術(shù)及定量分析方法評(píng)估單側(cè)輸尿管梗阻大鼠模型腎血流灌注改變的應(yīng)用價(jià)值，并與病理對(duì)照分析，為臨床無(wú)創(chuàng)定量評(píng)價(jià)梗阻性腎病的血流灌注提供理論依據(jù)。
　　 材料和方法：實(shí)驗(yàn)對(duì)象為天津醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心育種的健康SD大鼠10只，所有大鼠行麻醉下手術(shù)結(jié)扎左側(cè)輸尿管建立單側(cè)輸尿管梗阻模型，每只大鼠分別于建模前和建模后7天進(jìn)行CEUS檢查。
　

2、　 CEUS檢查于七氟烷吸入式麻醉狀態(tài)下進(jìn)行，使用彩色超聲診斷儀(IU22型，荷蘭飛利浦公司)，L9-3線陣探頭，探頭使用頻率3～9MHz，將儀器調(diào)制到諧波狀態(tài)，幀頻15～20fps，機(jī)械指數(shù)設(shè)置到0.06，圖像深度約4.0cm，時(shí)間增益補(bǔ)償(timegaincompentation，TGC)曲線控制滑板全部至于中間位置，聚焦點(diǎn)設(shè)置在腎臟感興趣區(qū)（regionofinterest,ROI）中部，沿左腎長(zhǎng)軸超聲探查。于鼠尾靜脈穿刺插管團(tuán)

3、注注射用六氟化硫微泡（Sonovue，Bracco公司，瑞士）混懸液0.2ml，隨即推注生理鹽水1ml沖管。注射造影劑同時(shí)啟動(dòng)圖像采集以實(shí)時(shí)觀察左腎血流灌注造影動(dòng)態(tài)過(guò)程，連續(xù)采集6分鐘。15分鐘后如前所述順序再次注射造影劑行大鼠右側(cè)腎臟CEUS檢查。UUO術(shù)后7天CEUS檢查結(jié)束后立即處死大鼠取雙腎標(biāo)本，利用1％福爾馬林固定后，行石蠟包埋切片和常規(guī)HE染色。
　　 CEUS結(jié)束后，使用QLAB軟件（版本號(hào)8.1，荷蘭飛利浦公司）

4、進(jìn)行腎血流灌注定量分析。將ROI分別設(shè)置于與聲束垂直的腎皮質(zhì)和腎髓質(zhì)，描繪腎臟血流灌注時(shí)間-強(qiáng)度曲線(TIC)，再由TIC獲取相關(guān)參數(shù)，包括曲線上升支斜率(sloperateofascendingcurve，A);峰值強(qiáng)度（peakintensity，PI）;達(dá)峰時(shí)間(timetopeak，TTP);曲線下面積(areaundercurve，AUC)。
　　 使用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件處理所得數(shù)據(jù)，各測(cè)量值用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x

5、)±s)表示。統(tǒng)計(jì)方法采用兩獨(dú)立樣本資料的t檢驗(yàn)，P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.CEUS結(jié)果:10只大鼠除1只大鼠死于麻醉意外，其余9例完成UUO模型術(shù)前和術(shù)后檢查。9只大鼠UUO術(shù)前與術(shù)后梗阻側(cè)及健側(cè)腎臟超聲造影劑顯影順序相同，首先腎動(dòng)脈顯影，繼而腎皮質(zhì)顯影，最后腎髓質(zhì)顯影;廓清順序則與增強(qiáng)順序相反。UUO造模術(shù)后7天梗阻側(cè)腎皮質(zhì)較術(shù)前灌注速度明顯減慢，增強(qiáng)程度減低、造影劑廓清時(shí)間延長(zhǎng);腎

6、髓質(zhì)較術(shù)前灌注速度減慢，造影劑廓清時(shí)間延長(zhǎng)，但增強(qiáng)程度變化不大;健側(cè)腎皮質(zhì)較術(shù)前血流灌注速度、增強(qiáng)程度變化不大，但造影劑廓清時(shí)間延長(zhǎng);健側(cè)髓質(zhì)較術(shù)前血流灌注速度、強(qiáng)度及造影劑廓清時(shí)間變化不大。
　　 2.超聲定量分析結(jié)果:UUO術(shù)后梗阻側(cè)腎皮質(zhì)血流灌注曲線較術(shù)前上升及下降均緩慢，TTP顯著延長(zhǎng)（術(shù)前21.27±4.08s，術(shù)后27.42±6.17s，）(P＜0.05)，A（術(shù)前1.81±0.45dB/s，術(shù)后0.88±0.79d

7、B/s，）(P＜0.05)及PI（術(shù)前16.50±1.36dB，術(shù)后13.60±2.64dB）（P＜0.05）較術(shù)前均明顯減低，AUC(術(shù)前1309.40±306.93dB.s，術(shù)后1508.43±481.56dB.s)(P＜0.05)較術(shù)前明顯增高;梗阻側(cè)腎髓質(zhì)血流灌注曲線較術(shù)前上升及下降均緩慢，TTP（術(shù)前25.59±3.92s，術(shù)后28.48±4.67s）(P＜0.05)，TTP較術(shù)前明顯增高，但A、PI和AUC較術(shù)前無(wú)明顯變化（

8、P＞0.05）;健側(cè)腎皮質(zhì)血流灌注曲線與術(shù)前30s之內(nèi)相似，30s后曲線下降緩慢，AUC（術(shù)前1209.94±298.41dB.s，術(shù)后1311.50±406.14dB.s）(P＜0.05)較術(shù)前明顯增高，A、PI和TTP較術(shù)前無(wú)明顯變化（P＞0.05）;健側(cè)腎髓質(zhì)血流灌注曲線較術(shù)前無(wú)明顯變化，A、PI、TTP和AUC較術(shù)前無(wú)明顯變化(P＞0.05)。
　　 3.病理檢查結(jié)果UUO術(shù)后7天CEUS檢查結(jié)束后立即處死大鼠取雙腎標(biāo)本

9、，置于1％福爾馬林溶液固定后，行石蠟包埋切片和常規(guī)HE染色。所有9只梗阻側(cè)腎臟均較健側(cè)腎臟體積明顯增大，梗阻側(cè)腎呈缺血狀顏色改變，腎盂腎盞擴(kuò)張，腎乳頭變平乃至消失，腎實(shí)質(zhì)變薄，皮髓質(zhì)分界欠清晰;鏡下，梗阻側(cè)腎臟近曲小管及遠(yuǎn)曲小管均出現(xiàn)不同程度的擴(kuò)張，腎間質(zhì)均出現(xiàn)單核巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)，腎間質(zhì)水腫增寬，其中2例腎小管萎縮(22.2％，)提示早中期腎纖維化形成。健側(cè)腎臟大體及鏡下檢查較正常狀態(tài)改變不大。
　　 結(jié)論：CEUS及