2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、研究目的:研究FSHR基因單核苷酸多態(tài)性Thr307Ala和Asn680Ser在中國漢族不孕癥女性人群中的分布特征,探討該遺傳多態(tài)性對FSH刺激后卵巢反應的影響,并研究其與OHSS的關(guān)系;研究FSHR基因單核苷酸多態(tài)性Thr307Ala和Ser680Asn影響FSH刺激后卵巢反應的具體分子機制,并探討這些多態(tài)是否影響FSHR的表達和功能。
  研究方法:采用聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態(tài)性(polymerase chain r

2、eaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)對450名不孕癥女性患者進行FSHR基因Thr307Ala和Asn680Ser位點的基因型分析,檢測月經(jīng)第三天基礎(chǔ)FSH水平、基礎(chǔ)雌激素水平和基礎(chǔ)LH水平;檢測醋酸曲普瑞林控釋注射劑降調(diào)節(jié)后的FSH水平、雌激素水平和LH水平;檢測絨毛膜促性腺激素給藥日的雌激素水平、LH水平和孕酮水平,陰道B超檢查月經(jīng)第三天基礎(chǔ)竇卵泡數(shù)量、

3、絨毛膜促性腺激素給藥日卵泡數(shù)和排卵前卵泡數(shù),B超引導經(jīng)陰道穿刺取卵并記錄獲卵數(shù)。所得實驗數(shù)據(jù)應用PHASE軟件進行單倍型分析;應用Haploview軟件進行連鎖不平衡分析;應用方差分析、卡方檢驗和多元logistic回歸分析進行統(tǒng)計學分析。體外使用定點誘變的方法構(gòu)建不同基因型FSHR真核表達載體,并以HEK293細胞為模型建立野生型和不同突變型FSHR穩(wěn)定表達細胞株。然后,分別利用半定量Real-Time PCR和Western Blo

4、tting技術(shù)檢測上述多態(tài)是否影響FSHR的表達。最后,用ELISA檢測上述突變對FSHR所介導cAMP水平的影響。
  研究結(jié)果:
  1.FSHR基因Thr307Ala位點突變型AA(GG基因型)組的基礎(chǔ)FSH(mIU/ml)水平[7.38±2.07 vs6.34±1.75,6.63±1.94,P<0.05,95%CI(6.75,8.01)]顯著高于野生型TT(AA基因型)和突變雜合子型TA(AG基因型)組,且AA組的刺

5、激天數(shù)顯著高于TT和TA組;Ser680Asn位點突變型SS(GG基因型)組的基礎(chǔ)FSH(mIU/mL)水平[7.51±2.01 vs6.31±1.75,6.66±1.96,P<0.05,95% CI(6.88,8.15)]顯著高于野生型NN(AA基因型)和突變雜合子型NS(AG基因型)組,且SS組的刺激天數(shù)顯著高于NN和NS組。
  2.使用FSH后,攜帶FSHR基因Thr307Ala位點AA組和Ser680Asn位點SS組的不

6、孕癥女性患者發(fā)生卵巢低反應的比例均顯著高于其他組,然而307和680位點基因型與OHSS的發(fā)生無統(tǒng)計學意義。
  3.FSHR基因Thr307Ala和Ser680Asn多態(tài)性位點連鎖不平衡分析顯示D'=0.95,r2=0.84,有統(tǒng)計學意義。
  4.FSHR Thr307Ala和Ser680Asn基因多態(tài)性在HEK293細胞系中不影響FSHR mRNA和蛋白表達水平,并且不同基因多態(tài)性在HEK293細胞系中對cAMP的分泌

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