NDRG2在大鼠前腦及人胚胎呼吸系統(tǒng)分布特點的研究.pdf

1、【研究背景】 Ndrg2與ndrg1、ndrg3和ndrg4共同構(gòu)成了一個新的基因家族，即ndrg家族。該基因家族參與了細胞的生長，但具體機制仍不清楚。人ndrg2由我的導師鄧艷春教授發(fā)現(xiàn)，其基因組全長為9.33kb,位于染色體的14q11.2，mRNA全長2024bp，編碼含357個氨基酸殘基，分子量約為40.79kD，因此曾命名為p40和SYLD。同源性分析表明，其與ndrg1(也稱做腦發(fā)育相關(guān)蛋白)具有高度同源性，并含有一

2、個酰基攜帶蛋白結(jié)構(gòu)域，故稱為ndrg2。研究結(jié)果初步顯示，ndrg2在多種正常組織中高表達，而在某些腫瘤組織和腫瘤細胞系中低表達或無表達，推測該基因可能與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān), 因此提出ndrg2可能為新的抑癌候選基因。新近資料表明，ndrg2參與了抑郁癥和阿爾茨海默氏病等腦部疾病的發(fā)生發(fā)展，NDRG2的表達還受腎上腺類固醇和抗抑郁藥物的調(diào)節(jié)，進行該研究時還發(fā)現(xiàn)NDRG2廣泛表達于星形膠質(zhì)細胞。我室近期研究發(fā)現(xiàn)NDRG2蛋白在小鼠和人胚胎

3、發(fā)育過程中具有一定的時間和空間表達特性，隨著組織、器官的成熟表達更為顯著和廣泛。此外NDRG2蛋白在小鼠生后發(fā)育過程中心、腦、肝、腎和骨骼肌中具有一定時間和空間表達特性，NDRG2蛋白廣泛表達于成年小鼠的多種組織。侯雙興等研究表明NDRG2在胎腦發(fā)育過程中具有一定時間空間的表達特性，認為NDRG2在胎腦各腦功能區(qū)中廣泛表達，并隨著腦發(fā)育的成熟，表達更為顯著，從而推測ndrg2可能對神經(jīng)細胞發(fā)育、成熟有重要影響，同ndrg1一樣是一種腦發(fā)

4、育相關(guān)基因，但其在出生后腦發(fā)育各階段的表達情況還沒有人研究；而且作為發(fā)育相關(guān)基因ndrg2在中樞神經(jīng)系統(tǒng)外的其他系統(tǒng)發(fā)育過程的表達有什么規(guī)律，目前也不清楚。 【研究目的】 1. 探討NDRG2在出生后不同年齡大鼠前腦的表達規(guī)律。 2. 探討NDRG2在不同胎齡16～28周人胚胎呼吸系統(tǒng)的表達情況。 【研究方法】 1. 免疫熒光雙重標記法 從蛋白水平確定NDRG2在不同年齡大鼠前腦的表達特點

5、及細胞定位。 取1天（新生兒期）、60天（青年期）及240天（中年期）大鼠前腦組織，用NDRG2與GFAP免疫熒光雙重標記法觀察NDRG2蛋白在大鼠前腦的表達規(guī)律（數(shù)目、形態(tài)及分布）及NDRG2同GFAP 的位置關(guān)系。 2. 免疫組織化學法 從蛋白水平確定NDRG2在16～28周人胚胎呼吸系統(tǒng)的表達特點及細胞定位。 搜集16～28周人工流產(chǎn)胎兒呼吸系統(tǒng)的肺和氣管組織，制成石蠟切片，用抗NDRG2單克隆抗體

6、，行免疫組化染色（ABC法），從蛋白水平觀察NDRG2 表達情況。統(tǒng)計陽性細胞數(shù)，利用統(tǒng)計學方法，判斷不同胎齡的肺和氣管間NDRG2表達有無差別。 【結(jié)果】 1. 可見NDRG2在蒼白球、皮質(zhì)、梨狀皮質(zhì)、背側(cè)丘腦、下丘腦、脈絡(luò)叢等部位有廣泛的表達，免疫陽性產(chǎn)物在灰質(zhì)中的表達多于白質(zhì)。值得注意的是在1天及60天大鼠的前腦中，NDRG2蛋白主要表達于神經(jīng)細胞、室管膜細胞及脈絡(luò)叢上皮細胞的胞漿中，未觀察到與GFAP共表達；而在

7、240天的大鼠腦組織中，在蒼白球、皮質(zhì)、視神經(jīng)、背側(cè)丘腦及下丘腦可見NDRG2蛋白與GFAP陽性細胞共表達。此外本研究首次發(fā)現(xiàn)3個年齡段的大鼠視上核神經(jīng)細胞內(nèi)均可觀察到NDRG2蛋白的表達。 2. NDRG2在16～28周胚胎呼吸系統(tǒng)中有廣泛的表達，陽性產(chǎn)物主要位于上皮細胞的胞漿中，但是不同胎齡之間NDRG2的表達未見明顯差別。 【結(jié)論】 1. NDRG2蛋白在1天及60天大鼠前腦內(nèi)的神經(jīng)細胞廣泛表達，可能是nd

8、rg2作為發(fā)育相關(guān)基因，廣泛參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)生長發(fā)育的結(jié)果。在240天大鼠前腦觀察到NDRG2蛋白與GFAP共表達，而在1天及60天大鼠腦內(nèi)未觀察到NDRG2蛋白與GFAP共表達，提示中年大鼠前腦內(nèi)星形膠質(zhì)細胞也表達NDRG2。此外，本研究首次發(fā)現(xiàn)NDRG2 蛋白在3個年齡段大鼠下丘腦視上核的神經(jīng)細胞均有表達。 2. NDRG2蛋白在16～28周人胚胎呼吸系統(tǒng)的假復層柱狀纖毛上皮和單層立方上皮有廣泛的表達，提示ndrg2在中、末