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1、本研究分為二部分: 試驗(yàn)一:白介素-1 受體拮抗劑對(duì)大鼠已退變椎間盤細(xì)胞凋亡的影響 目的:建立雙后肢大鼠模型,探討白介素-1 受體拮抗劑(IL-1Ra)對(duì)大鼠已退變椎間盤細(xì)胞凋亡的影響。 方法:建立雙后肢大鼠模型36只,隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組,每組18只,試驗(yàn)組從造模3個(gè)月后開始給予腹腔注射IL-1Ra(50ng/kg體重),隔天重復(fù)注射至處死,對(duì)照組18只,與試驗(yàn)組同時(shí)間開始給予隔日腹腔注射等量生理鹽水。試驗(yàn)組
2、和對(duì)照組于造模后第4、5、6個(gè)月末分別處死6只大鼠,完整取出L4/5椎間盤,固定、切片,使用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記法(TUNEL法)檢測(cè)各組雙后肢大鼠椎間盤細(xì)胞的凋亡情況,并使用透射電鏡觀察凋亡細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。取L5/6椎間盤使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組雙后肢大鼠椎間盤細(xì)胞的凋亡率。 結(jié)果:術(shù)后第4、5、6個(gè)月試驗(yàn)組與對(duì)照組大鼠椎間盤細(xì)胞的凋亡有顯著性差異(P<0.05)。 結(jié)論:IL-1Ra對(duì)大鼠已退
3、變椎間盤的細(xì)胞凋亡有明顯的抑制作用。 試驗(yàn)二:白介素-1 受體拮抗劑對(duì)已退變大鼠椎間盤基質(zhì)代謝的影響 目的:建立椎間盤退變的大鼠模型,探討白介素-1 受體拮抗劑(IL-1Ra)對(duì)大鼠已退變椎間盤基質(zhì)代謝的影響。 方法:建立雙后肢大鼠模型36只,隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組,每組18只,試驗(yàn)組從造模3個(gè)月后開始即予腹腔注射IL-1Ra(50ng/kg體重),隔天重復(fù)注射至處死,對(duì)照組18只不予任何處理。于造模后4、5、6
4、個(gè)月每組分別處死6只大鼠,完整取出L4/5椎間盤固定、切片,予SABC法進(jìn)行免疫組化,并使用圖像分析系統(tǒng)對(duì)髓核中II型膠原染色進(jìn)行灰度值掃描,同理取出L5/6椎間盤,使用間苯三酚法測(cè)量蛋白多糖含量。 結(jié)果:第4、5、6三個(gè)月時(shí)試驗(yàn)組與對(duì)照組髓核中II型膠原灰度值及蛋白多糖含量有差異,實(shí)驗(yàn)組髓核中II型膠原灰度值均低于對(duì)照組,蛋白多糖含量均高于對(duì)照組,兩組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論:IL-1Ra對(duì)雙后肢大鼠
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