單鏈結(jié)合蛋白SOSS1的組裝、與單鏈DNA以及INTS6蛋白結(jié)合的分子機(jī)制研究.pdf

1、細(xì)胞內(nèi)的DNA會不斷的遭受細(xì)胞內(nèi)新陳代謝產(chǎn)物或細(xì)胞外源物質(zhì)的攻擊，造成DNA損傷并引起基因組不穩(wěn)定，甚至可以影響到細(xì)胞的DNA相關(guān)代謝過程，例如DNA復(fù)制或轉(zhuǎn)錄。DNA損傷通常包括堿基替換，單鏈和雙鏈斷裂，DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)和無堿基位點，從而引起基因突變或染色體變異等更復(fù)雜的變化。真核生物中有兩大主要的DNA雙鏈損傷修復(fù)方式，分別為非同源末端連接修復(fù)和同源重組修復(fù)。非同源末端連接修復(fù)發(fā)生在整個細(xì)胞周期過程中，而同源重組修復(fù)主要發(fā)生在S或

2、者G2期。在同源重組修復(fù)開始階段，DNA雙鏈損傷部位會被剪切成3'端單鏈DNA，而這一步對于Rad51介導(dǎo)的鏈交換是很重要的。SOSS1蛋白復(fù)合體主要包括SOSSA，SOSSB1和SOSSC，它們能夠識別單鏈DNA(ssDNA)，參與DNA同源重組修復(fù)的過程。然而，對于SOSS1是如何組裝并識別單鏈DNA的過程還不清楚。我們通過對于SOSSA的N端(SOSSAN)，SOSSB1和SOSSC晶體學(xué)結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)SOSSAN能夠作為一個支架與

3、SOSSB1和SOSSC相互結(jié)合。對SOSSAN/B1和SOSSAN/B1/C在與單鏈DNA結(jié)合時的晶體學(xué)結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)SOSSB1能夠識別長達(dá)9個核苷酸的單鏈DNA。這些晶體學(xué)結(jié)構(gòu)對于闡釋SOSS1的組裝，以及對單鏈DNA的識別過程的分子機(jī)制是很重要的。整合因子復(fù)合體亞基6(INTS6)作為腫瘤抑制因子，能夠通過直接與SOSSA1相互作用而與SOSS1發(fā)生反應(yīng)。在DNA損傷信號通路中，INTS6能夠與SOSSA和SOSSB1相互作用，重