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1、近年來(lái),單分子技術(shù)得到了快速的發(fā)展,越來(lái)越多的研究者開(kāi)始使用單分子操縱來(lái)研究生物大分子。DNA分子是生物體的重要組成部分,在生物體進(jìn)行復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯的過(guò)程中起著重要的作用,使遺傳信息在RNA和蛋白質(zhì)等生物大分子間轉(zhuǎn)移。
雙鏈DNA形成的動(dòng)力學(xué)過(guò)程對(duì)生物進(jìn)程和生物傳感器有著重要影響。人們通常使用熒光標(biāo)記的方法來(lái)研究這個(gè)形成過(guò)程。本文利用磁鑷技術(shù)來(lái)研究?jī)蓷l單鏈DNA的結(jié)合和分離,研究這個(gè)動(dòng)力學(xué)過(guò)程時(shí)單鏈DNA并不需要熒光標(biāo)記,將
2、有28個(gè)堿基的單鏈DNA和磁球相連,然后通過(guò)磁鑷對(duì)磁球施加一個(gè)作用力,通過(guò)磁鐵控制力的大小,溶液中的單鏈DNA可以和受力單鏈DNA自由結(jié)合、分離。我們就能觀察到一個(gè)簡(jiǎn)單的兩態(tài)模型,得出它們分離速率和結(jié)合速率跟力的依賴(lài)關(guān)系。然后改變?nèi)芤褐袉捂淒NA的堿基個(gè)數(shù)對(duì)DNA的兩個(gè)速率進(jìn)行測(cè)量,在測(cè)量速率和力的依賴(lài)關(guān)系的同時(shí)我們也對(duì)濃度和速率的依賴(lài)關(guān)系進(jìn)行了測(cè)量;還測(cè)試了另一種只有26個(gè)堿基的單鏈DNA,反應(yīng)過(guò)程中形成第二種有氣泡結(jié)構(gòu)的雙鏈DNA,
3、然后對(duì)比兩種結(jié)構(gòu)的差異。
在研究力和速率的依賴(lài)過(guò)程中,我們發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)的能量分布曲線并不能用傳統(tǒng)的理論模型來(lái)解釋?zhuān)钥赡苄枰o出新的模型來(lái)解釋有力作用時(shí),兩條DNA分離的模型;在研究濃度和速率的依賴(lài)過(guò)程中,當(dāng)改變堿基個(gè)數(shù)時(shí),濃度和速率的關(guān)系跟第一種結(jié)構(gòu)相比較有很微小的變化,但是也基本符合傳統(tǒng)理論,分離速率不受到濃度影響,結(jié)合速率成正比。在后續(xù)的實(shí)驗(yàn)中將會(huì)繼續(xù)改變堿基個(gè)數(shù)來(lái)觀察這兩個(gè)速率的變化。以后的工作中我們也可能會(huì)改變溫度來(lái)對(duì)
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