釀酒酵母菌和白念珠菌中RCK2和HOG1蛋白激酶在高滲脅迫，氧化脅迫和細(xì)胞壁完整性方面的功能研究.pdf

1、釀酒酵母ScRck2p是一種MAP Knase激活的蛋白激酶，被Hoglp磷酸化而激活，響應(yīng)于細(xì)胞對外界高滲透壓脅迫和氧化脅迫。在本工作中我們發(fā)現(xiàn)釀酒酵母ScRCK2基因的缺失能夠?qū)е录?xì)胞對TOR抑制劑——雷帕霉素敏感，但ScRCK2在細(xì)胞對雷帕霉素敏感過程中的作用并不依賴于其激酶活性。在人體內(nèi)最常見的機會致病菌-白念珠菌中，我們鑒定了ScRCK2的同源基因CaRCK2,并發(fā)現(xiàn)CaRCK2基因的缺失同樣導(dǎo)致白念珠菌細(xì)胞對雷帕霉素敏感，C

2、aRck2p的這一作用同樣不依賴于其激酶活性。此外，我們發(fā)現(xiàn)白念珠菌CaHOG1的缺失也導(dǎo)致細(xì)胞對雷帕霉素的敏感。這些結(jié)果表明在釀酒酵母菌和白念珠菌中，作用于HOG途徑下游的RCK2可能調(diào)控TOR信號途徑的功能。
　　 同時，我們發(fā)現(xiàn)白念珠菌CaRCK2基因的缺失能夠?qū)е录?xì)胞對高滲脅迫、氧化脅迫和細(xì)胞壁完整性脅迫試劑敏感。比較而言，釀酒酵母ScRCK2基因的缺失只引起細(xì)胞對氧化脅迫敏感，而不影響細(xì)胞對高滲脅迫和細(xì)胞壁完整性脅迫試

3、劑的敏感。但是，釀酒酵母ScRCK2基因卻能夠彌補白念珠菌CaRCK2基因缺失株對高滲脅迫、氧化脅迫和細(xì)胞壁完整性脅迫試劑的敏感性表型。這些結(jié)果說明RCK2在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮多種功能，但在白念珠菌和釀酒酵母菌中的功能存在分歧。
　　 我們還發(fā)現(xiàn)，ScRCK2上游激酶基因ScHOG1和ScPBS2的缺失，以及受ScHOG1調(diào)控的轉(zhuǎn)錄因子基因ScHOT1，ScMSN1，ScMSN2，ScMSN4或ScRLM1的缺失，不影響酵母細(xì)胞對雷帕霉