造血干細(xì)胞移植病人與腸道微生態(tài)的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　本研究通過對(duì)干細(xì)胞移植患者與正常對(duì)照者之間糞便菌群種類及特異菌群的定量研究，了解干細(xì)胞移植患者腸道菌群結(jié)構(gòu)差異及數(shù)量的變化，并探討干細(xì)胞移植患者是否出現(xiàn)腸道細(xì)菌結(jié)構(gòu)紊亂從而引起院內(nèi)感染。
　　方法：
　　本研究為前瞻性，觀察性研究。根據(jù)入選標(biāo)準(zhǔn)，納入復(fù)旦大學(xué)附屬華東醫(yī)院血液科進(jìn)行干細(xì)胞移植的患者，收集患者干細(xì)胞移植前7-10天、干細(xì)胞移植后7-10天，干細(xì)胞移植后發(fā)生感染時(shí)的糞便標(biāo)本。另外收集20個(gè)正常人的

2、糞便標(biāo)本作為對(duì)照。根據(jù)細(xì)菌的16SrDNA基因序列設(shè)計(jì)大腸埃希菌、糞腸球菌屬、乳酸桿菌屬、及擬桿菌屬的引物，運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量-聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)定量檢測(cè)兩組患者中這四種細(xì)菌的數(shù)量變化。
　　結(jié)果：
　　經(jīng)RT-PCR對(duì)大腸埃希菌、腸球菌屬、乳酸桿菌屬、擬桿菌屬定量檢測(cè)后發(fā)現(xiàn):
　　1.HSCT患者3組相比:造血干細(xì)胞移植后發(fā)生感染時(shí)、干細(xì)胞移植前7-10天及干細(xì)胞移植后7-10天相比，糞便中3種細(xì)菌（大腸埃

3、希菌、腸球菌屬、和乳酸桿菌屬）數(shù)量增多，其變化量分別為大腸埃希菌8.66±2.65 vs8.55±1.11 vs7.97±0.49， p=0.735;腸球菌屬7.47±1.75 vs6.70±1.76 vs7.09±1.54， p=0.14;乳酸桿菌9.03±0.29 vs7.57±0.28 vs8.69±0.19 p=0.009。而在造血干細(xì)胞移植后7-10天，患者腸道中擬桿菌屬數(shù)量增加，與造血干細(xì)胞移植后發(fā)生感染時(shí)及干細(xì)胞移植前7-

4、10天相比，分別為6.74±0.19 vs6.58±0.28 vs6.67±0.24,p=0.964。
　　2.造血干細(xì)胞移植后發(fā)生感染時(shí)腸道細(xì)菌數(shù)量較對(duì)照組增加，分別為大腸埃希菌8.66±2.65 vs8.51±0.54，p=0.795，腸球菌屬7.47±1.75 vs7.11±1.06，p=0.000，乳酸桿菌屬9.03±0.29 vs8.67±0.43，p=0.72，擬桿菌屬6.67±0.24 vs6.66±0.28，p=0

5、.243。與對(duì)照組相比，造血干細(xì)胞移植前7-10天患者腸道中大腸埃希菌及糞球菌屬數(shù)量下降，分別為7.97±0.49vs8.51±0.54,p=0.417;7.09±1.54 vs7.11±1.06, p=0.580。而乳酸桿菌屬及擬桿菌屬數(shù)量增多，分別為8.69±0.19 vs8.67±0.43, p=0.954;6.74±0.19vs6.66±0.28, p=0.85。
　　3.HSCT患者3個(gè)采樣點(diǎn)比較，只有乳酸桿菌屬數(shù)量有顯

6、著差異(p=0.009)，其他菌種之間無顯著差異(p＞0.05)。而造血干細(xì)胞移植后發(fā)生感染時(shí)與對(duì)照組相比，4種細(xì)菌都有所增加，分別為大腸埃希菌8.66±2.65 vs8.51±0.54，腸球菌屬7.47±1.75 vs7.11±1.06，乳酸桿菌屬9.03±0.29 vs8.67±0.43和擬桿菌屬6.67±0.24 vs6.66±0.28)，但只有腸球菌屬的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.000)。
　　4.造血干細(xì)胞移植前7-1

7、0天大便菌群數(shù)量總體較對(duì)照組有所下降，但只乳酸桿菌屬的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.002)。
　　結(jié)論：
　　1.與對(duì)照組相比，造血干細(xì)胞移植后發(fā)生感染時(shí)腸道細(xì)菌明顯增多。當(dāng)造血干細(xì)胞移植后發(fā)生感染時(shí)腸道細(xì)菌結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。
　　2.當(dāng)造血干細(xì)胞移植后發(fā)生感染時(shí)腸道細(xì)菌結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，主要為腸道兼性厭氧細(xì)菌，其中以乳酸桿菌屬及大腸埃希菌最為顯著。
　　3.Real-time PCR方法檢測(cè)糞便中細(xì)菌DNA能反映腸道細(xì)