紡錘體組裝關(guān)卡基因hsMAD2在HCC中的表達(dá)及其對(duì)HepG2作用的研究.pdf

1、人原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌(human primary hepatocellular carcinoma,HCC)是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一,流行病學(xué)及病因?qū)W的研究資料表明,肝細(xì)胞癌已經(jīng)成為嚴(yán)重危害人類生命的主要疾病之一,其發(fā)病率在中國肝病患者中有明顯增加趨勢.但有關(guān)肝細(xì)胞癌的發(fā)病機(jī)制,目前仍未完全清楚.有關(guān)人原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌與hsMAD2的相關(guān)性研究,尚未見報(bào)道.該研究的主要內(nèi)容和結(jié)果如下:1、采用免疫組化技術(shù),在39例肝癌組織及15例癌旁

2、肝組織、26例肝硬化組織和3例肝癌細(xì)胞系檢測了hsMAD2的表達(dá)與分布情況.2、采用基因轉(zhuǎn)染技術(shù),將hsMAD2真核表達(dá)載體pcDNA3.1-hsMAD2轉(zhuǎn)入人肝癌細(xì)胞系HepG2中,觀察其對(duì)HepG2細(xì)胞生長的影響.免疫細(xì)胞化學(xué)、Western Blot等方法證實(shí)hsMAD2已被成功地轉(zhuǎn)入HepG2細(xì)胞中.并通過觀察細(xì)胞形態(tài)、測量生長曲線和分裂指數(shù)曲線,觀察hsMAD2基因?qū)epG2細(xì)胞生長和細(xì)胞增殖能力的影響.3、Nocodazo

3、le處理對(duì)細(xì)胞的影響:當(dāng)經(jīng)過紡錘體阻滯劑50nM nocodazole處理后,HepG2-hsMAD2細(xì)胞生長速度下降,差異具有顯著性,細(xì)胞周期出現(xiàn)G2期阻滯.相對(duì)地,HepG2在受到Nocodazole處理后無明顯變化.該研究表明,hsMAD2在肝癌中的表達(dá)降低或缺失,在HepG2呈缺失表達(dá);單純表達(dá)外源性hsMAD2對(duì)細(xì)胞無明顯影響;HepG2-hsMAD2細(xì)胞經(jīng)nocodazole處理后,G2期阻滯顯著,細(xì)胞生長受阻,hsMAD2