高氟對(duì)子代大鼠甲狀腺及腦發(fā)育、腦功能的影響.pdf

1、目的：前期實(shí)驗(yàn)中已成功制備出高氟導(dǎo)致甲狀腺形態(tài)損傷和甲狀腺功能低減的親代模型大鼠。在此基礎(chǔ)上，本文進(jìn)一步觀察研究其子代大鼠甲狀腺損傷和中樞神經(jīng)系統(tǒng)腦發(fā)育、腦學(xué)習(xí)記憶功能情況并初步探討了可能的機(jī)制，為治療和預(yù)防高氟導(dǎo)致大腦損傷提供一定的參考。
　　 方法：選用Wistar大鼠36只，雌雄各半，隨機(jī)分為四組：正常對(duì)照組7只、高氟組14只、高氟甲狀腺激素替代組7只、單純甲狀腺功能低減組8只，雌雄各半，分別飲用自來(lái)水；加入NaF200m

2、g/L/d的高氟水；飲用高氟水的高氟甲狀腺激素替代組，一周后同時(shí)每天以0.008％甲狀腺干制劑混懸液1.8ml/200g體重/只腹腔注射進(jìn)行替代，并將混懸液濃度每月遞增0.008％；甲減組飲用自來(lái)水，同時(shí)將溶于生理鹽水的PTU按1mg/100g/d腹腔注射。5個(gè)月后，各組分別雌雄交配產(chǎn)生子代大鼠，分別為正常子代大鼠（N組）：常規(guī)喂養(yǎng)：高氟甲狀腺功能低減子代大鼠（FP組）：此組子代大鼠再隨機(jī)分為兩組，一組為孕后替代組（T2組），飲用高氟水

3、同時(shí)，于懷孕后1周起每日腹腔注射甲狀腺素（甲狀腺片）2μg/100g體重進(jìn)行替代，另一組為高氟組（F組），持續(xù)飲用高氟水；替代組子代大鼠(T1組)：在飲用高氟水同時(shí)予甲狀腺干制劑混懸液1.8ml/200g體重/只灌胃腹腔注射；單純甲減子代大鼠（P組）：按lmg/100g/d腹腔注射溶于生理鹽水的PTU。30天后子代與母代大鼠分籠，待子代大鼠2-3月齡時(shí)，做水迷宮測(cè)其腦功能。4月齡時(shí)殺鼠，用放射免疫法測(cè)定各組子代大鼠血清TT3、TT4、T

4、SH含量；光鏡下觀察子代大鼠甲狀腺和海馬形態(tài)結(jié)構(gòu)；免疫組化方法檢測(cè)海馬區(qū)域NMDAR2B蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1、生長(zhǎng)和體重變化:F組和P組生長(zhǎng)曲線明顯低于N組(P<0.05)，T1組稍高于N組(P>0.05)，T2組在10周前與N組相近，10周后體重增長(zhǎng)曲線逐漸偏低于N組，但仍高于F和P組(P>0.05)。
　　 2、甲狀腺變化:(1)甲狀腺指數(shù)：F組明顯低于N組(P<0.05)，而P組明顯高于N組(

5、P<0.05)，T2組和T1組與N組無(wú)差異(P>0.05)。
　　 (2)甲狀腺功能：F組和P組TT3、TT4明顯低于N組(P<0.05)，TSH明顯高于N組(P<0.01)；T1組TT3、TT4與N組相近(P>0.05)，TSH接近正常組(P>0.05)；T2組TT3偏低于N組，明顯高于F組(P<0.05)和P組，TT4與N組相近(P>0.05)，TSH偏高于N組。
　　 (3)HE染色顯微鏡觀察：N組甲狀腺濾泡上皮結(jié)

6、構(gòu)正常，排列有序，濾胞無(wú)增生或萎縮；F組濾泡上皮增生，數(shù)量及層次增加，排列紊亂，細(xì)胞呈柱狀或高柱狀，甚至可向?yàn)V泡腔突出形成乳頭。濾泡萎縮，濾泡數(shù)量減少，排列稀疏，大小不等；間質(zhì)血管擴(kuò)張充血，管腔增大，充滿；間質(zhì)有炎細(xì)胞散在浸潤(rùn)；間質(zhì)纖維組織呈灶性或彌漫性增生；P組少量濾泡上皮增生，均見(jiàn)濾泡內(nèi)膠質(zhì)減少，濾泡腔空虛，紅染均質(zhì)物減少，間質(zhì)血管擴(kuò)張充血，間質(zhì)血管官腔增大、充滿：T1、T2組甲狀腺損害較F組和P組輕，僅見(jiàn)濾泡上皮增生。T2組少數(shù)可

7、見(jiàn)間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤(rùn)和間質(zhì)血管擴(kuò)張充血。
　　 3、海馬變化:
　　 (1)海馬指數(shù)：P組明顯低于N組(P<0.05)，F(xiàn)組、T1組和T2組與N組相近(P>0.05)。
　　 (2)水迷宮測(cè)定：在第一次水迷宮（學(xué)習(xí)能力）測(cè)試中，F(xiàn)組和P組爬上平臺(tái)所用時(shí)間明顯長(zhǎng)于N組爬上平臺(tái)所用時(shí)間(P<0.01)，T1組和T2組爬上平臺(tái)所用時(shí)間與N組爬上平臺(tái)所用時(shí)間相近(P>0.05)。在第二次水迷宮（記憶能力）測(cè)試中，F(xiàn)組和P組爬

8、上平臺(tái)所用時(shí)間明顯低于第一次爬上平臺(tái)所用的時(shí)間，但仍然明顯長(zhǎng)于N組爬上平臺(tái)所用的時(shí)間(P<0.01)，T1組和T2組爬上平臺(tái)所用時(shí)間與N組爬上平臺(tái)所用時(shí)間相近(P>0.05)。
　　 (3)HE染色顯微鏡觀察：N組海馬神經(jīng)元細(xì)胞排列有序，輪廓清晰，結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)正常，細(xì)胞核深染，尼氏體清楚可見(jiàn)。F組海馬組織結(jié)構(gòu)變疏松，染色變淺，細(xì)胞稀疏，有水腫空泡形成。海馬神經(jīng)元細(xì)胞腫脹，神經(jīng)元體積較正常增大，細(xì)胞漿染色變淺，胞核體積較正常增大

9、，染色變淺；尼氏體消失；神經(jīng)元排列明顯紊亂，細(xì)胞層次結(jié)構(gòu)破壞，極性消失；部分神經(jīng)纖維增生紊亂，紅染絲條狀的神經(jīng)纖維數(shù)量增多、增粗、排列；少量神經(jīng)元壞死，神經(jīng)元結(jié)構(gòu)模糊或破壞，突起消失，細(xì)胞漿染色加深，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)模糊、固縮、碎裂。P組除了有腦組織水腫及神經(jīng)元腫脹，神經(jīng)元變性，神經(jīng)元排列紊亂外，神經(jīng)元壞死外，還有膠質(zhì)細(xì)胞增生，腦組織內(nèi)膠質(zhì)細(xì)胞散在、彌漫、灶性或結(jié)節(jié)狀增生。T1組和T2組海馬組織損傷較F組和P組輕，僅見(jiàn)部分腦組織水腫海馬神經(jīng)元

10、輕度腫脹、變性，神經(jīng)元排列有序，神經(jīng)元壞死減少。
　　 (4)NMDA受體亞單位NR2B免疫組化染色，數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)：NMDAR2B受體免疫組化染色呈棕黃色，主要著色在海馬CA1區(qū)的胞膜及胞漿，胞核不著色。F組和P組陽(yáng)性細(xì)胞比值明顯少于N組(P<0.01)，T1組陽(yáng)性細(xì)胞比值與N組相近(P>0.05)，T2組陽(yáng)性細(xì)胞比值高于F組，明顯高于P組(P<0.05)。
　　 4、大腦變化
　　 大腦重量：F組和P組大腦重量

11、偏低于N組(P<0.05)，T1組、T2組大腦重量于N組相近(P>0.05)。各組大腦指數(shù)無(wú)明顯差異。
　　 結(jié)論：
　　 1、慢性氟中毒子代大鼠與親代大鼠一樣可發(fā)生明顯的腦損傷和腦認(rèn)知能力降低。
　　 2、慢性氟中毒子代大鼠與親代大鼠一樣可發(fā)生明顯的甲狀腺損傷和甲狀腺功能降低。
　　 3、慢性氟中毒子代大鼠，無(wú)論是在氟中毒同時(shí)防止甲狀腺功能低減還是在其胚胎期糾正甲狀腺功能低減，均可明顯減輕腦損傷和腦認(rèn)知