A型肉毒毒素對兔耳瘢痕攣縮的抑制效應.pdf

1、目的:一些研究表明BTXA對增生性瘢痕具有一定的治療作用,可以促進成纖維細胞凋亡、減少膠原的合成。本研究通過建立兔耳腹側增生性瘢痕模型,創(chuàng)面早期注射BTXA,動態(tài)觀察BTXA對創(chuàng)面收縮、瘢痕形成、肌成纖維細胞的增殖(或a-SMA蛋白的表達)的影響,探討瘢痕攣縮的機理,為瘢痕的防治提供有實際應用價值的理論依據和有效方法。
　　 方法:①實驗分組:新西蘭大白兔24只,體質量(2.5±0.3)kg,兔耳健全,雌雄不拘,隨機數字表法將2

2、4只新西蘭大白兔隨機分為3組:生理鹽水組、BTXA組、醋酸曲安奈德組。每組8只大白兔,32個創(chuàng)面。②實驗方法:建立兔耳瘢痕模型,生理鹽水組、醋酸曲安奈德組每個創(chuàng)面每次分別注射生理鹽水0.3ml、醋酸曲安奈德0.3m1(2mg),以上兩組均每周1次,共4次；BTXA組每個創(chuàng)面每次注射BTXA0.3m1(3IU),創(chuàng)面制作當日及術后15天各1次。③實驗評估:分別在術后16、30、40、60d進行形態(tài)學觀察并記錄瘢痕發(fā)生情況、測量瘢痕面積、測

3、定瘢痕增生指數、免疫組化法檢測不同時期瘢痕組織中肌成纖維細胞的表達及變化情況。
　　 結果:納入實驗兔24只(48只耳)均進入結果分析,中途無脫落。①BTXA組、醋酸曲安奈德組可以降低兔耳瘢痕增生指數,同一時間BTXA組、醋酸曲安奈德組瘢痕增生指數分別與生理鹽水組相比,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；醋酸曲安奈德組對瘢痕增生的抑制比BTXA組更明顯,兩組瘢痕增生指數相比,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。②BTXA組、醋酸曲

4、安奈德組可以減輕瘢痕攣縮,同一時間BTXA組、醋酸曲安奈德組瘢痕面積分別與生理鹽水組相比,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05):醋酸曲安奈德組對瘢痕攣縮的抑制比BTXA組更明顯,兩組瘢痕面積相比,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。③術后30和60d在光鏡下觀察各組的HE、VG染色以及免疫組化切片可見:生理鹽水組瘢痕組織真皮層明顯增厚,成纖維細胞及肌成纖維細胞最多,真皮中含大量排列致密、粗大的膠原纖維,排列混亂,呈旋渦狀或結節(jié)狀,形成膠原結

5、節(jié)；BTXA組瘢痕組織真皮層變薄,成纖維細胞及肌成纖維細胞數量較少,膠原纖維致密下降,表層排列規(guī)則,呈水平向,漩渦狀結構減少；醋酸曲安奈德組瘢痕組織真皮層最薄,成纖維細胞數量及肌成纖維細胞數量最少,膠原纖維排列規(guī)則,無膠原結節(jié)或者膠原結節(jié)不明顯,膠原纖維密度下降。④分別在術后16、60d測量各組瘢痕免疫組化切片中肌成纖維細胞中的α-SMA蛋白(棕黃色顆粒者)光密度值,結果表明同一時間生理鹽水組肌成纖維細胞α-SMA蛋白表達最多,BTXA

6、組數量次之,醋酸曲安奈德組最少,各組之間分別相比,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 結論:1.兔耳創(chuàng)面在一定時間內能產生類似人類增生性瘢痕樣病變。2.BTXA可明顯抑制兔耳創(chuàng)面增生性瘢痕的形成及瘢痕組織增生,同時可抑制增生性瘢痕的攣縮。3.BTXA抑制兔耳瘢痕增生和攣縮的效應可能是通過抑制(肌)成纖維細胞增殖或促進其凋亡,減少膠原的合成來實現的。4、BTXA抑制兔耳瘢痕增生和攣縮的效應不及醋酸曲安奈德抑制兔耳瘢痕增生和攣