A型肉毒毒素對(duì)胃癌細(xì)胞的抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、胃癌在消化道惡性腫瘤中最為常見，我國(guó)胃癌發(fā)病率居肺癌之后排第二位。對(duì)于不能手術(shù)的進(jìn)展期胃癌，近年來(lái)化療及靶向治療已取得較大成效，但總體效果仍不理想，許多地區(qū)進(jìn)展期胃癌的5年生存率更是不足20％。為進(jìn)一步提高胃癌的治療效果，有必要不斷探索新的治療方法。A型肉毒毒素（botulinumtoxin typeA，BTX-A）是一種由肉毒梭菌產(chǎn)生的神經(jīng)毒素，已廣泛應(yīng)用于美容領(lǐng)域及肌肉痙攣性疾病的治療。近年來(lái)，有研究報(bào)道BTX-A可以抑制前列腺癌及

2、乳腺癌細(xì)胞的增殖。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明，BTX-A可通過(guò)去神經(jīng)化作用抑制小鼠胃癌的生長(zhǎng)，但BTX-A能否對(duì)胃癌細(xì)胞有直接抑制作用，機(jī)理如何，目前尚屬空白。
　　目的:通過(guò)對(duì)BTX-A對(duì)胃癌細(xì)胞增殖和遷移能力的影響的研究，探索BTX-A對(duì)胃癌細(xì)胞是否有抑制作用，為胃癌治療探索新的方法。
　　方法:選取兩株胃癌細(xì)胞系BGC-823和MGC-803作為本實(shí)驗(yàn)的研究對(duì)象。采用MTT法和克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)BTX-A對(duì)胃癌BGC-823和MG

3、C-803細(xì)胞系增殖能力的影響;采用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)BTX-A對(duì)胃癌BGC-823和MGC-803細(xì)胞系遷移能力的影響。
　　結(jié)果:①不同濃度（0.25 IU/ml、0.5 IU/ml、1 IU/ml）BTX-A對(duì)BGC-823和MGC-803細(xì)胞系的增殖均有抑制作用，且隨著劑量增大，抑制作用增強(qiáng)。其中，1 IU/ml BTX-A對(duì)BGC-823和MGC-803細(xì)胞系的抑制作用最為明顯。1IU/mlBTX-A組與對(duì)照組(0 IU/

4、ml)BGC-823和MGC-803細(xì)胞系的吸光度（OD值）分別為0.54±0.02 vs.0.62±0.01、0.50±0.01 vs.0.56±0.02，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　?、? IU/ml BTX-A作用不同時(shí)間(0h、24h、48h、72h、96h)對(duì)BGC-823和MGC-803細(xì)胞系的增殖能力均具有抑制作用，且隨著時(shí)間延長(zhǎng)，抑制作用增強(qiáng)。72h時(shí)，BGC-823和MGC-803細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組

5、的吸光度（OD值）分別為0.46±0.03vs.0.52±0.03、0.59±0.01 vs.0.66±0.02，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);96h時(shí)，BGC-823和MGC-803細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的吸光度（OD值）分別0.47±0.04vs.0.56±0.05、0.62±0.01vs.0.69±0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　③通過(guò)克隆形成實(shí)驗(yàn)證實(shí)，BTX-A可以抑制BGC-823和MGC-803

6、細(xì)胞系克隆形成能力。經(jīng)BTX-A作用14d后， BGC-823和MGC-803細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組的克隆形成數(shù)目分別為229.33±17.99 vs.297.33±19.69、77.33±9.98 vs.157.33±16.11，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　?、芡ㄟ^(guò)細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，BTX-A可以抑制BGC-823和MGC-803細(xì)胞系的遷移能力，且隨著時(shí)間延長(zhǎng)，抑制效果增強(qiáng)。經(jīng)BTX-A作用72h后， BGC-823