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1、第一部分:
目的:建立周圍神經(jīng)損傷后選擇性再生的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,并檢測(cè)PTN的mRNA表達(dá)。
方法:12只三周齡SD大鼠隨機(jī)分成2組,每組6只,均采用切斷右側(cè)L2~L5背根神經(jīng)節(jié)后纖維和右側(cè)股神經(jīng)橫切-吻合方案手術(shù)。A組于術(shù)后4周、B組于術(shù)后8周進(jìn)行逆向示蹤實(shí)驗(yàn),采用FD和TD分別通過股神經(jīng)運(yùn)動(dòng)支與感覺支逆向示蹤標(biāo)記再生入運(yùn)動(dòng)神經(jīng)和感覺神經(jīng)的脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,并計(jì)數(shù);同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)受損感覺神經(jīng)、受
2、損運(yùn)動(dòng)神經(jīng)、受損神經(jīng)近端、失神經(jīng)肌肉及脊髓腰段PTN的mRNA表達(dá)。
結(jié)果:A組長(zhǎng)入運(yùn)動(dòng)神經(jīng)、感覺神經(jīng)和長(zhǎng)入兩種神經(jīng)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元數(shù)量分別為167±21,53±14,36±7;B組分別為252±14,37±8,21±4。A組受損運(yùn)動(dòng)神經(jīng)、受損感覺神經(jīng)、受損神經(jīng)近端、失神經(jīng)肌肉、脊髓腰段PTN的mRNA表達(dá)分別為:0.1487±0.0034,0.1287±0.0800,0.0664±0.0072,0.01485±0.0042,
3、0.2832±0.1071;B組分別為:0.2836±0.0366,0.0561±0.06964,0.0119±0.0067,0.4161±0.1409,1.1437±0.1574。
結(jié)論:該動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)P湍茌^準(zhǔn)確地反映周圍神經(jīng)損傷后運(yùn)動(dòng)神經(jīng)再生的傾向性,而且PTN的表達(dá)量與傾向性運(yùn)動(dòng)神經(jīng)再生存在一定的趨勢(shì)。
第二部分:
目的:研究PTN對(duì)周圍神經(jīng)損傷后PMR現(xiàn)象的影響。
方法:12
4、只三周齡SD大鼠隨機(jī)分成2組,每組6只,采用上述動(dòng)物模型方案。A組、B組在股神經(jīng)切斷處分別用PTN因子、PTN-Ig進(jìn)入干預(yù),8周后進(jìn)行逆向示蹤實(shí)驗(yàn),采用FD和TD分別通過股神經(jīng)運(yùn)動(dòng)支與感覺支逆向示蹤標(biāo)記再生入運(yùn)動(dòng)神經(jīng)和感覺神經(jīng)的脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,并計(jì)數(shù);同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)受損感覺神經(jīng)、受損運(yùn)動(dòng)神經(jīng)、受損神經(jīng)近端、失神經(jīng)肌肉及脊髓腰段PTN的mRNA表達(dá)。
結(jié)果:A組(PTN組)長(zhǎng)入運(yùn)動(dòng)支、感覺支、運(yùn)動(dòng)支和
5、感覺支共有的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元數(shù)目分別為:301±6,32±5,18±4;B組(PTN-Ig組)分別為:202±6,38±8,16±5;A組受損運(yùn)動(dòng)神經(jīng)、受損感覺神經(jīng)、受損神經(jīng)近端、失神經(jīng)肌肉及脊髓腰段PTN的mRNA表達(dá)分別為:0.0554±0.0008,0.5925±0.0507,0.0804±0.0004,0.1405±0.0350,0.3301±0.0263;B組分別為0.1152±0.1269,0.06643±0.0585,0.011
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