應激影響色素脫失模型小鼠黑色素合成機制的初步探討.pdf

1、目的：⑴兩種色素脫失模型方法的建立和比較,為進一步研究提供最佳模型。⑵從神經、免疫、內分泌三方面探討應激對色素脫失模型小鼠皮膚黑色素合成影響的生理機制,為色素脫失性皮膚病預防、治療及其新藥開發(fā)提供新思路和更可靠的實驗依據。
　　 方法：①分別采用過氧化氫和氫醌兩種脫色法建立色素脫失動物模型并對兩種方法進行比較。②采用C57BL/6J雄鼠,隨機分為空白對照組(Ctrl組)、氫醌組(HQ組)、氫醌+束縛應激組(HQ+RS組)、氫醌+

2、干擾素組(HQ+IFN組)、氫醌+氫化可的松組(HQ+GC組),應用氫醌進行色素脫失,并在此基礎上分別對HQ+RS組進行束縛應激,對HQ+IFN組注射α-2a重組人干擾素,對HQ+GC組注射和氫化可的松。實驗結束后,常規(guī)固定海馬并制作HE染色切片,鏡下觀察CA3區(qū)組織變化；固定皮膚組織并制作HE染色切片,鏡下觀察皮膚組織結構變化,并對毛囊進行計數；對胸腺、脾臟稱重并計算胸腺、脾臟指數；采用ELISA試劑盒檢測血清免疫球蛋白G(IgG)、

3、免疫球蛋白M(IgM)及促腎上腺皮質激素(ACTH)含量。
　　 結果：⑴過氧化氫造模,小鼠皮膚損害嚴重,但毛發(fā)生長未受明顯抑制；而采用氫醌造模,小鼠幾乎無肉眼可見的皮膚損害,但皮膚毛囊生長受到明顯抑制。這說明氫醌建立色素脫失模型更好。⑵HQ+RS組、HQ+IFN組、HQ+GC組小鼠體重、曠場實驗行為學評估均不同程度低于Ctrl組和HQ組,提示束縛應激、注射α-2a重組人干擾素和氫化可的松可成功模擬應激反應；同Ctrl組和HQ組

4、相比,HQ+RS組、HQ+IFN組、HQ+GC組小鼠海馬CA3區(qū)出現神經細胞排列不整齊、數量減少和結構改變；HQ組、HQ+RS組、HQ+IFN組小鼠血清IgG顯著高于Ctrl組(P<0.05),而HQ+GC組顯著低于Ctrl組；HQ組、HQ+RS組、HQ+IFN組、HQ+GC組小鼠血清IgM含量均顯著高于Ctrl組(P<0.05)；HQ+RS組、HQ+GC組和HQ+IFN組均小鼠胸腺指數低于HQ組和Ctrl組(P<0.05)；HQ+RS

5、組、HQ+GC組小鼠脾臟指數低于HQ組和Ctrl組,而HQ+IFN組高于HQ組和Ctrl組(P<0.05)；HQ+RS組、HQ+IFN組、HQ+GC組小鼠血清ACTH含量均顯著高于Ctrl組和HQ組(P<0.05)；Ctrl組相比,HQ組、HQ+RS組、HQ+IFN組、HQ+GC組小鼠皮膚總毛囊數目和生長期毛囊數目顯著減少(P<0.05)；同HQ組相比,HQ+RS組、HQ+IFN組、HQ+GC組小鼠皮膚總毛囊數目有不同程度的減少。

6、>　　 結論：①氫醌能更好地從抑制色素合成方面阻斷黑色素的產生,從而建立色素脫失模型。②束縛應激、α-2a IFN的注射和氫化可的松注射,能較好地從心理、免疫、內分泌學角度模擬機體應激反應。③束縛應激通過機體神經、免疫、內分泌三大系統(tǒng)的改變對皮膚黑色素的合成產生影響。④通過注射α-2a IFN增加免疫因子后,機體神經和內分泌系統(tǒng)發(fā)生改變,進而對皮膚黑色素合成產生影響。⑤通過注射氫化可的松增加機體糖皮質激素后能夠更顯著的對皮膚黑色素合成