何首烏水提物對小鼠黑素瘤細胞黑色素生成影響的研究.pdf

1、隨著社會的發(fā)展，人們越來越追求自身的健康和完美，擁有黑亮的頭發(fā)是許多人所渴望的，而白發(fā)脫發(fā)作為影響外表的最常見的原因之一，往往給患者帶來精神上的很大煩惱。據(jù)文獻記載，傳統(tǒng)中藥何首烏具有烏須發(fā)、延年益壽的功效。黑色素產(chǎn)生于皮膚的黑色素細胞，其生物合成過程需多種酶介導，酪氨酸酶是其中重要的酶，它能夠?qū)⒗野彼嵫趸癁槎喟?DoPA)，進一步氧化成多巴醌(DoPA quinone)，在別的酶的催化下氧化聚合成黑色素。
　　 本文以小鼠B1

2、6F1黑素瘤細胞為材料，以不同終濃度的何首烏水提取液處理細胞，分別為0mg/ml、0.1mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml。采用MTT法、體外氧化L-多巴反應(yīng)法、NaOH法分別檢測其對細胞增殖、細胞中酪氨酸酶活性、細胞中黑素生成量的影響；采用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(yīng)（RT-PCR）的方法檢測其對細胞中酪氨酸酶基因、酪氨酸酶相關(guān)蛋白-1(TRP-l)基因、酪氨酸酶相關(guān)蛋白-2(TRP-2)基因及MITF基因mRNA表達的影響；

3、采用Western blot免疫印跡法檢測其對上述四種基因的蛋白質(zhì)表達的影響。研究發(fā)現(xiàn)，何首烏水提取物能夠激活B16F1黑素瘤細胞中酪氨酸酶的活性，并增加黑色素的合成量，同時還具有促進黑素細胞增殖的作用。何首烏水提取物可以提高上述黑色素合成相關(guān)的四種基因及其蛋白質(zhì)的表達量。而且，從結(jié)果可以看出，在0—1mg/ml的濃度范圍內(nèi)，隨著何首烏水提取物濃度增大，細胞增殖、酪氨酸酶的活性和基因表達、蛋白質(zhì)表達也會隨之上調(diào)。通過實驗我們發(fā)現(xiàn)：何首烏