褐飛虱TRPV通道兩個(gè)亞型基因與取食行為關(guān)系.pdf

1、褐飛虱(Nilaparvata lugens(St(a)l))是水稻上一種非常重要的刺吸式口器害蟲(chóng)。作為近年來(lái)褐飛虱田間防治的常用殺蟲(chóng)劑，吡蚜酮一直被認(rèn)為是通過(guò)抑制褐飛虱對(duì)韌皮部的取食使其饑餓而死，而近期研究表明吡蚜酮可能作用于昆蟲(chóng)TRPV通道（Transient receptor potential vaniloid channel，瞬時(shí)感受器電位香草酸受體亞型通道）。本研究通過(guò)RNA干擾的方法沉默褐飛虱TRPV通道兩個(gè)亞型Inact

2、ive(Iav)和Nanchung(Nan)的基因，結(jié)果表明褐飛虱TRPV通道與取食行為關(guān)系密切。具體結(jié)果如下:
　　1.克隆褐飛虱Nan和Iav基因，分別與果蠅和豌豆蚜的Nan基因和Iav基因進(jìn)行序列比對(duì)。其中，Iav基因克隆片段與豌豆蚜和果蠅Iav基因相似度分別為83％和85％; Nan基因克隆片段與豌豆蚜和果蠅的相似度分別為85％和83％。進(jìn)一步驗(yàn)證克隆所得片段即分別為褐飛虱Iav和Nan基因片段。
　　2.將褐飛虱分

3、別注射dsIav和dsNan1 d和3d后，Iav和Nan基因的表達(dá)量顯著低于注射dsGFP的褐飛虱。Iav干擾后統(tǒng)計(jì)褐飛虱7d內(nèi)的存活率，結(jié)果表明，第3d和第4d存活率顯著低于對(duì)照，而其他天數(shù)與對(duì)照相比無(wú)顯著差異，而Nan基因干擾之后褐飛虱7d之后存活率僅為26.67％，顯著低于對(duì)照的存活率;RNA干擾后，褐飛虱的足均無(wú)異常情況。
　　3.Iav基因和Nan基因干擾后，通過(guò)EPG監(jiān)測(cè)成蟲(chóng)在水稻植株上的取食，結(jié)果表明，Iav和Na

4、n基因干擾之后褐飛虱韌皮部取食均受到抑制。其中，Iav基因干擾后，口針的刺探次數(shù)和路徑波時(shí)間延長(zhǎng)而韌皮部取食時(shí)間和刺探次數(shù)顯著低于對(duì)照。Nan基因干擾后，與對(duì)照相比木質(zhì)部取食時(shí)間和非刺探時(shí)間延長(zhǎng)，而韌皮部的取食時(shí)間和韌皮部刺探次數(shù)降低。
　　4.將RNA干擾之后的褐飛虱通過(guò)EPG監(jiān)測(cè)成蟲(chóng)對(duì)液態(tài)飼料取食，發(fā)現(xiàn)Iav基因和Nan基因干擾后對(duì)蔗糖溶液的取食與對(duì)照相比均無(wú)顯著差異。
　　綜上所述，褐飛虱TRPV兩個(gè)亞型基因的沉默會(huì)抑