FMRF酰胺對小鼠嗅感覺神經(jīng)細(xì)胞外向延遲整流鉀電流的影響.pdf

1、目的：探討FMRF酰胺(苯丙-甲硫-精-苯丙氨酸多肽)對小鼠嗅感覺神經(jīng)細(xì)胞外向延遲整流鉀電流的作用，以明確其在嗅覺的產(chǎn)生和傳導(dǎo)中的作用。 方法：應(yīng)用酶結(jié)合機械分離的方法，急性分離小鼠嗅感覺神經(jīng)細(xì)胞，并將狀態(tài)良好的神經(jīng)細(xì)胞用于全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)。膜片鉗記錄時，將TTX及CdCl<,2>加到細(xì)胞外液中，阻斷內(nèi)向鈉電流和鈣電流，因此，我們實驗中我們只記錄了小鼠嗅感覺神經(jīng)細(xì)胞的外向鉀電流。FMRF酰胺以5μ m的終濃度加到細(xì)胞外液中，設(shè)定

2、相應(yīng)程序，記錄加藥前后外向延遲整流鉀電流的變化。所得的數(shù)據(jù)經(jīng)過膜片鉗放大器放大濾波后，輸入計算機，用pCLAMP8.1軟件系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和分析。研究在細(xì)胞外液中加入5 μ m的FMRF酰胺對小鼠嗅感覺神經(jīng)細(xì)胞胞體的外向延遲整流鉀電流(IK)的峰值電流幅度和最大電流密度以及電壓依賴性激活動力學(xué)特性的影響。實驗數(shù)據(jù)均以“均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差”(x±s)的形式表示。應(yīng)用SPSS11.0軟件包中配對t檢驗進(jìn)行統(tǒng)計分析，P<0.05認(rèn)為具有統(tǒng)計學(xué)差異。

3、 結(jié)果：急性分離的小鼠嗅感覺神經(jīng)細(xì)胞，其細(xì)胞膜上可以記錄到內(nèi)向鈉電流和外向鉀電流，其中外向鉀電流主要由延遲整流鉀電流IK和瞬時鉀電流IA組成。I<,K>具有延遲激活和不失活的特性，而I<,A>快速激活后快速失活。在細(xì)胞外液中加入5μm的FMRF酰胺可以加大I<,K>電流的峰值電流幅度和最大電流密度，但是，并不影響該電流的電壓依賴性激活動力學(xué)。 結(jié)論：(1)利用酶結(jié)合機械分離方法可以成功分離狀態(tài)良好的小鼠嗅感覺神經(jīng)細(xì)胞，并