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文檔簡介
1、目的:以前的實驗研究工作觀察到實驗高壓電燒傷后動物的大體標本如腸系膜、腸黏膜、軟腦膜、深筋膜、腎皮質、胃黏膜、肝臟等的微循環(huán)變化,發(fā)現(xiàn)高壓電不僅引起外周組織的微循環(huán)紊亂,而且引起遠隔器官的微循環(huán)紊亂,從而導致全身出現(xiàn)微循環(huán)障礙,引起機體損傷,微觀的表現(xiàn)可以觀察到血清內白細胞沿血管壁翻滾及黏附、白色微小血栓流動及紅細胞聚集現(xiàn)象等。已有實驗證明高壓電燒傷后血清中免疫球蛋白超家族(1g-SF)粘附分子出現(xiàn)增多,因此,我們設計本實驗旨在通過觀察
2、高壓電燒傷大鼠免疫球蛋白超家族黏附分子(ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1)在心肌組織上表達的連續(xù)變化,進一步探討高壓電燒傷心臟微循環(huán)紊亂的機制,及己酮可可堿對免疫球蛋白超家族黏附分子表達的干預,為高壓電燒傷后心臟微循環(huán)障礙防治提供理論依據(jù),盡最大可能的減輕病人心肌損傷,降低病人的死亡率,提高生存率。
方法:
1 實驗動物分組:成年健康雄性SD大鼠(河北醫(yī)科大學動物實驗中心提供,合格證編號101016
3、0)180只,隨機分成三組,分別為高壓電燒傷實驗組(簡稱實驗組)、高壓電燒傷己酮可可堿(PTX)治療組(簡稱治療組)與假高壓電燒傷組(簡稱對照組),每組各60只。對照組、高壓電燒傷實驗組和PTX治療組又分別分為電擊前、電擊即刻(15min內)(T1)、傷后1h(T2)、2h(T3)、4h(T4)、8h(T5)6個不同的時相,并有空白對照組,為非電擊非治療組(T0),每組10只。各組分別編號后分籠飼養(yǎng)。
2 實驗前準備:大鼠
4、稱重,按大鼠編號記錄在冊。將實驗藥品按實驗需要配成所需濃度。
3 高壓電燒傷模型復制:將變壓器及調壓器正確連接待用,用1%戊巴比妥鈉按40mg/kg給藥麻醉大鼠,待麻醉成功后,給予大鼠左上肢、右下肢及胸部備皮,然后將大鼠仰臥于動物絕緣臺上,四肢伸展固定于高壓輸出電路之間,并分別固定1cm2圓形銅制電極片于大鼠的左上肢、右下肢脫毛區(qū),左上肢為入口,右下肢為出口。接通電源調整變壓器輸出電壓10KV,給予實驗組與治療組實驗動物分
5、別電擊3s,對照組給予假電,整個過程中無電流通過,其他條件各組均相同。治療組在電擊后即刻腹腔注射1%PTX(按50mg/kg即5ml/kg給藥),對照組及電擊組電擊后立即腹腔給予注射5ml/kg生理鹽水。
4 標本采集與保存:將復制成功高壓電燒傷大鼠模型麻醉后開胸,直視下采心肌組織,以心尖組織為代表,收集0.5cm×0.5cm×0.5cm大小心尖組織,做成石蠟切片,保存待用。
5 指標檢測:采用免疫組織化學方
6、法分別檢測電燒傷早期不同時相心尖組織中ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1表達情況,及己酮可可堿對三項指標的干預效果。
6 實驗數(shù)據(jù)處理:所有計量資料用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析處理,實驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差(-x±s)表示,采用兩因素析因設計的方差分析(ANOVA)對實驗得到數(shù)據(jù)進行分析,以P<0.05為有顯著性差異。
結果:心肌組織中ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的變化:
7、r> (1)對照組組內比較無顯著性差異(P>0.05)。
(2)高壓電燒傷后早期實驗組不同時相心尖組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1水平高于對照組及電前ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的水平(P<0.05);其中ICAM-1表達水平是從電擊后15min開始增高,并持續(xù)到8h;VCAM-1傷后15min開始增多,電擊傷后2h表達明顯升高,傷后4h即達到峰值,到傷后8h有所降低,但仍未恢復電擊前水平
8、;PECA-1傷后2h表達量達高峰,以后隨時間下降,但到傷后8h仍高于對照組。
(3)高壓電燒傷后早期PTX治療組不同時相心肌組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1高于對照組及電前心尖組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的水平(P<0.05),但同一時相較電擊組心尖組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的水平有不同程度下降;其中VCAM-1的表達水平傷后8h下降明顯,PECAM-1的表達水平在傷后
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