高壓電燒傷大鼠血清IL-3、GM-CSF的變化及烏司他丁、甲強龍的干預作用.pdf

1、目的:高壓電燒傷有別于其他燒傷，是一種特殊原因所致的機體損傷，可使機體產生一系列連鎖反應，導致微循環(huán)障礙其中血小板流變性變化及數(shù)量異常是導致機體微循環(huán)障礙的關鍵因素之一。燒傷后血管受損害或破裂，血小板受刺激被激活，由靜止相變?yōu)闄C能相，進一步影響血小板生成。血小板生成素（thromboietin，TPO）和巨核細胞集落刺激因子（megakaryocyte colony stimulating factor, MK-CSF）是血小板生成的正

2、調節(jié)因子。當機體血小板減少時，TPO及MK-CSF調節(jié)巨核細胞祖細胞增殖產生巨核細胞，MK-CSF刺激巨核細胞成熟，促進巨核細胞胞質與細胞核脫離、分割，形成血小板并釋放入血。IL-3和IL-6在血小板形成過程中發(fā)揮正調節(jié)作用，IL-3可刺激巨核細胞增殖，IL-6可加速巨核細胞成熟分化，且兩者協(xié)同加速血小板生成。粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor，

3、GM-CSF)和促紅細胞生成素(Erythropoietin，EPO)對巨核細胞生成血小板也具有非特異性正調節(jié)作用。其中IL-3、GM-CSF是血小板生成正性調節(jié)的重要元素，可反映體內血小板計數(shù)及凝血過程的變化。因此，我們設計本實驗，旨在研究高壓電燒傷早期大鼠血清IL-3、GM-CSF變化，并通過烏司他丁(UTI)、甲強龍(MP)進行干預，研究燒傷后血小板生成及流變性變化機制，探討UTI、MP治療高壓電燒傷的可行性。
　　方法:<

4、br>　　1.實驗動物分組:健康成年SD大鼠（由河北醫(yī)科大學動物實驗中心提供，合格證編號為1303144）240只，按隨機數(shù)字表法分成四組，即假高壓電燒傷組（簡稱對照組）、高壓電燒傷組（簡稱電傷組）、高壓電燒傷治療組（簡稱治療組），其中治療組分為UTI、MP組，每組各60只。每組又按觀察時間分為電擊前15min、電擊后5min、電擊后1h、2h、4h、8h六個時相組，每時相10只。
　　2.實驗前準備:將大鼠編號、稱重，左上肢、右

5、下肢及前胸脫毛。將實驗藥品按實驗需要配成所需濃度。
　　3.高壓電燒傷模型制作:首先連接好實驗變壓器和調壓器電線。用1％戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉大鼠，按40mg/kg給藥，麻醉成功后，將大鼠仰臥于專用電擊實驗臺上，固定四肢，將兩個1 cm×1 cm電極片分別固定于大鼠的左上肢（電流入口）、右下肢（電流出口）脫毛區(qū)。接通電源后，調整調壓器使升壓器輸出電壓至2kV，連接升壓器，使高壓電流通過大鼠，電擊3s。對照組制作假電傷模型，不合閘通

6、過電流，其余步驟與電傷組一致。電擊5min內，兩個治療組腹腔分別注射5×104u/kg UTI、250mg/kg MP，對照組及電傷組腹腔內注射等量的生理鹽水。
　　4.標本采集與保存:將高壓電燒傷模型復制成功的大鼠開胸暴露心臟，直視下心臟抽血6mL，置于一次性使用真空采血管（紅）中，輕輕顛倒數(shù)次后靜置30min，上離心機，以3000轉/min離心10min，紅管中取上清液置于Eppendorf管中在-70℃條件下保存。
　

7、　5.指標檢測:置于冰箱的血清采用ELISA雙夾心抗體法，檢測IL-3、GM-CSF含量。
　　6.實驗數(shù)據(jù)處理:采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，行兩因素析因設計的方差分析，多重比較采用LSD法t檢驗。以P＜0.05為顯著性檢驗水準。
　　結果:
　　1.大鼠血漿IL-3含量變化電傷組IL-3數(shù)值與對照組相比明顯升高(P＜0.01)，且IL-3數(shù)值含量電傷后在一定時間內有顯著差異(P＜0.01)，呈上升趨勢。治療組IL-

8、3數(shù)值總體低于電傷組(P＜0.01)，且IL-3數(shù)值含量治療后在一定時間內有顯著差異(P＜0.01)，傷后5min、1h、2h、4h、8h與傷前相比有較明顯明顯差異(P＜0.01)。
　　2.大鼠血漿GM-CSF含量變化電傷組GM-CSF含量總體高于對照組(P＜0.01)，且GM-CSF含量受傷后隨時間有顯著差異(P＜0.01)，呈增高趨勢。治療組GM-CSF含量總體低于電傷組(P＜0.01)，且GM-CSF含量治療后隨時間有顯著