槲皮素對(duì)脂變?nèi)烁蜭-02細(xì)胞肉堿轉(zhuǎn)移酶Ⅰ及PPARγmRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究槲皮素對(duì)脂變?nèi)烁蜭—02細(xì)胞肉堿轉(zhuǎn)移酶I及過(guò)氧化物酶體增殖物活化受體γmRNA表達(dá)的影響。 方法：用10％(V/V)醫(yī)用脂肪乳注射液和10％(V/V)胎牛血清的RPMI—1640完全培養(yǎng)基孵育人肝L—02細(xì)胞24小時(shí)，制備肝細(xì)胞脂肪變性模型。以不同濃度(20μmol/l，40μmol/l，80μmol/l)槲皮素孵育人肝L—02細(xì)胞24小時(shí)，以濃度為40μmol/l槲皮素分別孵育模型組細(xì)胞6h，12h，24h，48h，

2、油紅O染色觀察細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞內(nèi)脂滴的形成情況，高效液相色譜法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)甘油三酯的含量，半定量RT—PCR法檢測(cè)肉堿轉(zhuǎn)移酶I和PPARγ的mRNA表達(dá)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x±s表示，用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，以P＜0.05作為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果：用脂肪乳注射液孵育人肝L—02細(xì)胞24小時(shí)后，油紅O染色符合肝細(xì)胞小泡性脂肪變性特征；HPLC測(cè)定細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量明顯增高，與正常組比較有顯著性差異，成功的制備肝細(xì)胞脂肪變性

3、模型。加入槲皮素(20μmol/l，40μmol/l，80μmol/l)孵育24小時(shí)后，油紅O染色胞漿內(nèi)脂滴與模型組比較明顯減低；HPLC結(jié)果發(fā)現(xiàn)：細(xì)胞內(nèi)總甘油三酯含量隨槲皮素劑量的增高而降低。以槲皮素(40μmol/l)濃度分別孵育模型組細(xì)胞6h，12h，24h，48h后，HPLC結(jié)果發(fā)現(xiàn)：細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量隨槲皮素處理時(shí)間的延長(zhǎng)呈時(shí)間依賴性降低。半定量RT—PCR法檢測(cè)各組細(xì)胞的CPT—1和PPARγ的mRNA水平。結(jié)果顯示，槲皮素