聚乙烯亞胺包被的四氧化三鐵磁性納米顆粒對SHI-1細胞生物學特性的影響及體內(nèi)初步成像.pdf

1、一、聚乙烯亞胺包被的四氧化三鐵磁性納米顆粒對SHI-1細胞生物學特性的影響
　　目的：初步探討聚乙烯亞胺包被的四氧化三鐵（PEI-Fe3O4）磁性納米顆粒對白血病細胞株SHI-1的生物學特性的影響，探究磁共振細胞影像技術(shù)跟蹤細胞生物學行為的可行性。
　　方法：（1）、以人急性單核細胞白血病細胞株SHI-1為對象，用透射電鏡觀察PEI-Fe3O4磁性納米顆粒能否被細胞內(nèi)吞；（2）、用電感耦合等離子發(fā)射光譜儀及普魯士藍染色觀察細

2、胞納米顆粒載量的影響因素；（3）、用CCK-8法檢測PEI-Fe3O4磁性納米顆粒對SHI-1細胞增殖的影響；用流式細胞術(shù)（FCM）檢測PEI-Fe3O4磁性納米顆粒對細胞分化、凋亡的影響；以甲基纖維素半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)法檢測PEI-Fe3O4磁性納米顆粒對細胞集落形成能力的影響；（4）、以transwell跨膜實驗檢測PEI-Fe3O4磁性納米顆粒對SHI-1細胞侵襲能力的影響；以熒光實時定量PCR檢測PEI-Fe3O4磁性納米顆粒對S

3、HI-1細胞MMP-2、MMP-9、CD44、CXCR4、TIMP-1、TIMP-2 mRNA表達水平的影響；以未經(jīng)PEI-Fe3O4磁性納米顆粒處理的SHI-1細胞作為對照組。
　　結(jié)果：（1）、PEI-Fe3O4磁性納米顆粒能成功被 SHI-1細胞內(nèi)吞；（2）、細胞內(nèi)磁性納米顆粒載量與其起始濃度及與細胞共培養(yǎng)的時間呈正相關(guān)，隨細胞分裂傳代而減少。（3）、以5~100μg Fe/ml PEI-Fe3O4處理細胞，60~100μg

4、 Fe/ml組對細胞的抑制率高于5~50μg Fe/ml組，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；30μg Fe/ml PEI-Fe3O4處理SHI-1后，和對照組相比，在TPA誘導分化前后的CD11b和CD14表達差異無統(tǒng)計學意義，（P>0.05）；以0、20、50μg Fe/ml PEI-Fe3O4處理24h后的SHI-1細胞的集落形成率，在各組間差異沒有統(tǒng)計學意義（P>0.05）；（4）、以0~50μg Fe/ml PEI-Fe3O

5、4處理SHI-1細胞24h，細胞凋亡率隨 PEI-Fe3O4濃度的增加而增高（P<0.05），實驗組SHI-1細胞侵襲能力較對照組顯著下降（P<0.05），測量標記細胞的MMP-2、MMP-9、CD44、CXCR4、TIMP-1、TIMP-2 mRNA表達水平發(fā)現(xiàn)TIMP-2表達下調(diào)，MMP-9表達上調(diào)。
　　結(jié)論：（1）、PEI-Fe3O4磁性納米顆?？筛咝蕵擞汼HI-1細胞；
　　（2）、在5~50μg Fe/ml范圍

6、內(nèi)，對SHI-1細胞的增殖、集落形成能力、分化沒有顯著影響；
　?。?）、25和50μg Fe/ml濃度的PEI-Fe3O4磁性納米顆粒對SHI-1細胞MMP-2、CD44、CXCR4、TIMP-1mRNA表達水平無影響，但使 TIMP-2表達下調(diào)，MMP-9表達上調(diào)。
　　二、聚乙烯亞胺包被的四氧化三鐵磁性納米顆粒標記的SHI-1細胞在裸鼠的MR成像
　　目的：白血病細胞的髓外浸潤常常成為白血病化療或移植后復發(fā)的根源

7、，若能及時發(fā)現(xiàn)白血病細胞的轉(zhuǎn)移和浸潤機理，對于白血病髓外浸潤病灶的臨床診斷和治療都將有重大意義。本文旨在通過應(yīng)用磁性納米顆粒PEI-Fe3O4標記的SHI-1細胞在裸鼠皮下成瘤并以MR檢測瘤體內(nèi)SHI-1細胞的信號，為在活體內(nèi)探究白血病，尤其是中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病的轉(zhuǎn)移和浸潤的病理生理機制奠定基礎(chǔ)。
　　方法：對20只4至6周齡的Babl/c裸鼠以環(huán)磷酰胺腹腔注射，隨機分為4組，每組5只裸鼠，將經(jīng)0、25、50μg Fe/ml PE

8、I-Fe3O4處理24h的SHI-1細胞1×107個分別注射于裸鼠的左前肢皮下，空白對照組在相同部位注射等體積的PBS，記錄各組別瘤體生長速度，應(yīng)用MR成像技術(shù)檢測瘤體信號強度，R T-P C R檢測皮下瘤體內(nèi)SHI-1細胞的MLL/AF6基因表達。
　　結(jié)果：經(jīng)0、25、50μg Fe/ml PEI-Fe3O4處理后SHI-1細胞的皮下成瘤率為100％，未經(jīng)標記的SHI-1組比較，25、50μg Fe/ml PEI-Fe3O4處