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文檔簡介
1、山東大學碩士學位論文乏氧對牙周膜細胞生物學特性的影響姓名:唐開亮申請學位級別:碩士專業(yè):口腔臨床醫(yī)學指導教師:李紓20090504山東大學碩士學位論文Trizol兩步法分別提取細胞總RNA,采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RTPCR)檢測HIF1QmRNA和VEGFmRNA的表達情況。4將牙周膜細胞以2X104個/ml接種于置有蓋玻片的6孔板中,按實驗分組移入培養(yǎng)箱中培養(yǎng),免疫組化技術檢測HIF1Ct與VEGF的表達情況。結果:1所有組別的細胞
2、增殖率隨培養(yǎng)時間呈依賴性的增高。乏氧24h與對照組相比增殖較大,但缺乏統(tǒng)計學差異。乏氧組乏氧48h與對照組相比增殖活性增高,差異有統(tǒng)計學意義◇o05)。2所有組別細胞的ALP活性隨培養(yǎng)時間而降低,但乏氧24h和48h與對照組相比ALP活性明顯降低,差別具有統(tǒng)計學意義◇005)。3乏氧組牙周膜細胞HIF1QmRNA的表達與對照組無統(tǒng)計學意義的差別。乏氧24h與48h牙周膜細胞VEGFmRNA的表達明顯高于對照組(球005)。4細胞爬片免疫
3、組織化學染色結果顯示:乏氧24h與48h的牙周膜細胞HIF一1Q表達呈陽性反應,乏氧24h大量HIF1a蛋白在胞核積聚,乏氧48h陽性染色顆粒在胞質(zhì)與胞核中沉積,而常氧環(huán)境下培養(yǎng)的細胞無觀察到HIF一1d蛋白的表達p001)。VEGF的表達呈時間依賴性增加,常氧48h后VEGF呈微弱陽性表達,乏氧組24h與48hVEGF的染色明顯強于對照組(薩O01)。結論:乏氧使牙周膜細胞增殖能力提高,ALP活性降低,HIF1Q與VEGF表達增加。雖
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