黏蛋白家族MUC2基因甲基化的檢測(cè)及對(duì)胰腺癌的診斷研究.pdf

1、目的：評(píng)價(jià)MUC2基因甲基化對(duì)胰腺癌早期診斷意義，并建立一種可行的胰腺癌基因甲基化檢測(cè)方法。 方法：采用RT-PCR法檢測(cè)MUC2 mRNA的表達(dá)；免疫組化法檢測(cè)MUC2蛋白的表達(dá)情況；甲基化特異性PCR(MSP)+直接測(cè)序法檢測(cè)MUC2基因啟動(dòng)子區(qū)發(fā)生甲基化的確切位點(diǎn)；采用甲基化限制性酶切(Msp Ⅰ/Hap Ⅱ)+PCR方法檢測(cè)胰腺癌患者外周血及糞便標(biāo)本中MUC2甲基化情況。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)：人胰腺癌細(xì)胞株ASPC、CFP

2、AC1、SW1990經(jīng)去甲基化制劑5-Aza處理后MUC2重新表達(dá)；同樣此3種胰腺癌細(xì)胞株經(jīng)MSP測(cè)序明確該基因啟動(dòng)子區(qū)5'CpG島的甲基化位點(diǎn)；在外周血標(biāo)本組中，40例胰腺癌標(biāo)本中16例甲基化(40.0％)，15例慢性胰腺炎中未發(fā)現(xiàn)甲基化，25例正常對(duì)照中1例甲基化(4.0％)。30例胰腺癌患者糞便標(biāo)本MUC2基因甲基化率為36.7％；8例慢性胰腺炎為0％；20例正常對(duì)照者甲基化率為5.0％。10例胰腺癌患者外周血及糞便標(biāo)本聯(lián)合檢測(cè)，