阿維鏈霉菌調(diào)節(jié)基因aveR1，aveR2缺失對阿維菌素產(chǎn)量的影響及缺失突變株發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf

1、阿維鏈霉菌產(chǎn)生的阿維菌素是一組高效、低毒、廣譜的殺蟲抗生素，在醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)和畜牧業(yè)生產(chǎn)中具有良好的應(yīng)用價值和廣闊的市場前景?！　?gòu)建的阿維鏈霉菌aveR1,aveR2基因缺失載體pXF05(pKC1139∷0.8kbR1+0.8kbR2+1.7kbhyg)分別轉(zhuǎn)入野生型菌株ATCC31267、高產(chǎn)菌株B-1-7和僅產(chǎn)阿維菌素B組分不產(chǎn)寡霉素的高產(chǎn)菌株D73-12，通過缺失質(zhì)粒pXF05和染色體之間的同源雙交換，對染色體上的aveR1,

2、aveR2基因進(jìn)行缺失。缺失突變株是在染色體上通過同源雙交換完成的，不會發(fā)生進(jìn)一步的重組，因此突變株性狀穩(wěn)定。將經(jīng)驗證正確的基因缺失突變株進(jìn)行搖瓶發(fā)酵，發(fā)現(xiàn)野生型菌株的產(chǎn)量提高了3倍多，但高產(chǎn)菌株B-1-7和D73-12的產(chǎn)量均未變化?！　∫訢73-12的aveR1,aveR2基因缺失突變株D-3為出發(fā)菌株，對其進(jìn)行了各種氮源和碳源的測試，結(jié)果表明氮源以酵母粉和黃豆餅粉的混合氮源為最佳，碳源以玉米淀粉和麥芽糖的混合碳源為最佳。兩種無機

3、氮源KNO3和(NH4)2SO4在低濃度下對于抗生素的合成均有一定的促進(jìn)作用，其中以0.05g/l的(NH4)2SO4作用最為明顯。同時研究了無機鹽和微量元素對于發(fā)酵的影響。最終確定了培養(yǎng)基中各種無機鹽和微量元素的含量分別為KCl6g/l，MgSO4·7H2O.0.9g/l，K2HPO4·3H2O0.9g/l，MnCl2·4H2O2mg/l，CoCl2·6H2O5mg/l，(NH4)2SO40.05g/l，滅菌前pH值調(diào)為7.2?！　?/p>