阿維菌素生產菌種的選育及發(fā)酵工藝的優(yōu)化.pdf

1、阿維菌素(Avermectin)是一種由阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)發(fā)酵產生的大環(huán)內酯類抗生素，在農作物、畜禽及人用藥等方面均有應用。本文以阿維菌素生產菌株QL69為研究對象，以提高阿維菌素的發(fā)酵水平為研究目的，圍繞菌種誘變篩選、發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化以及發(fā)酵工藝優(yōu)化進行了相關研究。
　　主要研究結果如下:
　　1.采用UV、LiC1、NTG相結合的誘變方法對阿維菌素生產菌種進行選育，篩選獲得1株高

2、產菌株UV-NTG-A7，實驗結果表明，在UV誘變60s，在NTG誘變濃度2.05mg/ml時，對現(xiàn)有出發(fā)菌株誘變條件最佳，得到高產突變株比對照菌株在小試試驗罐上提高了9.6％，突變株經傳代5次，其遺傳穩(wěn)定性較好。
　　2.對高產突變株UV-NTG-A7的發(fā)酵培養(yǎng)基進行了優(yōu)化，通過對碳源、氮源進行替代實驗，結合物料市場價格，選擇廉價的玉米淀粉、高溫黃豆餅粉作為最適碳、氮源。微量元素實驗結果表明，當添加硫酸鎳、氯化鈷、硫酸錳、鉬酸鈉

3、、硫酸銨濃度分別為0.0003％,0.02％,0.0002％，0.0023％，0.03％時，對阿維菌素效價均有提高。在發(fā)酵24h加入0.6％濃度的前體物質丙酸鈣，可以使發(fā)酵效價提高4.11％。
　　3.對發(fā)酵工藝進行了優(yōu)化，種子瓶考察確定了高產菌種UV-NTG-A7在轉入種子罐時種子瓶種齡選擇25h較合適，種子罐轉種時機為42h最佳，且其發(fā)酵效價達到6346.0μg/ml，高于其它轉種時間點。不同的轉種量實驗，確定了8％的轉種量為