低氧和HDAC抑制劑在心肌細(xì)胞對(duì)mir-126的協(xié)同誘導(dǎo)作用.pdf

1、組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(histoneacetykransferase，HAT)和組蛋白去乙?；?histonedeacetylase，HDAC)通過(guò)對(duì)組蛋白氮端氨基酸殘基進(jìn)行乙?；蛉ヒ阴；{(diào)節(jié)組蛋白的乙?；?。HDAC抑制劑通過(guò)增加細(xì)胞內(nèi)組蛋白的乙?；潭葋?lái)調(diào)控基因的表達(dá)。研究表明其對(duì)心肌肥厚和心力衰竭有治療作用，但它的保護(hù)機(jī)制尚未明確。微小RNA-126(MicroRNA-126miR-126)是內(nèi)皮細(xì)胞特異性的微小RNA，在心臟組

2、織激活細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(extracellularregulatedproteinkinasesErk)和蛋白激酶B(ProtainkinaseBAkt)，增加促血管生成信號(hào)。miR-126是否參與了HDAC抑制劑對(duì)缺血心臟的保護(hù)作用，尚未明確。
　　目的:研究低氧和HDAC抑制劑在心肌細(xì)胞對(duì)mir-126的協(xié)同誘導(dǎo)作用，探討HDAC抑制劑對(duì)心肌細(xì)胞的保護(hù)作用。
　　方法:將心肌細(xì)胞用曲古菌素A(TrichostatinA

3、TSA)（最常用的一種HDAC抑制劑）處理后放置低氧環(huán)境中，然后溶解細(xì)胞提取總RNA，用定量RT-PCR檢測(cè)miR-126的量，用WesternBlot檢測(cè)miR-126的下游效應(yīng)器ERK和Akt的變化，并用試劑盒檢測(cè)HDAC/HAT的活性，對(duì)照組未經(jīng)TSA處理。將攜帶miR-126表達(dá)片段的慢病毒系統(tǒng)感染心肌細(xì)胞，同樣檢測(cè)以上指標(biāo)，來(lái)明確miR-126參與了低氧和HDAC抑制劑對(duì)心肌細(xì)胞的作用過(guò)程。對(duì)照組用si-RNA來(lái)沉默miR-1

4、26的表達(dá)。體內(nèi)實(shí)驗(yàn):將心臟缺血小鼠分TSA處理和非TSA處理組，用HE染色分析心臟組織的梗塞情況，并且檢測(cè)miR-126的表達(dá)。
　　結(jié)果:急性缺氧引起HDAC和HAT的活化增強(qiáng)，低氧和HDAC抑制劑協(xié)同誘導(dǎo)miR-126的表達(dá)對(duì)ERK和Akt也具有協(xié)同作用。并且ERKandAkt受miR-126調(diào)節(jié)。1小時(shí)的低氧環(huán)境導(dǎo)致miR-126表達(dá)增加1.8士0.2倍(p＜0.05)，但同時(shí)用TSA來(lái)阻止HDAC，miR-126表達(dá)增加