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1、目的:1.研究原發(fā)性肝癌中Cks1和Cks2mRNA的表達(dá)水平。 2.研究原發(fā)性肝癌中Cks1和Cks2蛋白的表達(dá)水平。 3.探討Cks1和Cks2的表達(dá)與原發(fā)性肝癌各個(gè)臨床病理指標(biāo)的關(guān)系。 4.探討Cks1/Cks2與p27kipl在原發(fā)性肝癌中表達(dá)間的關(guān)系。 方法: 1.采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR相對(duì)定量法檢測(cè)原發(fā)性肝癌中Cks1、Cks2與p27kiplmRNA的表達(dá)水平。 2.采用免疫
2、組化法檢測(cè)原發(fā)性肝癌中Cks1、Cks2與p27kipl蛋白的表達(dá)水平。 結(jié)果: 1.成功建立了實(shí)時(shí)熒光定量PCR相對(duì)定量法檢測(cè)Cks1和Cks2的mRNA表達(dá)水平,擴(kuò)增效率分別為98.43%和95.22%,特異性好,重復(fù)性高(CV均低于3%)。 2.Cks1和Cks2在原發(fā)性肝癌組織中mRNA和蛋白的表達(dá)水平均明顯高于癌旁組織(肝炎組和肝硬化組)和正常肝組織組,統(tǒng)計(jì)有顯著性差異(P<0.05);而癌旁組織與正常
3、肝組織組無顯著性差異(P>0.05)。p27kiplmRNA的表達(dá)水平在癌組和癌旁組織(肝炎組和肝硬化組)中無明顯差異(P>0.05);但是蛋白表達(dá)水平在癌組織中明顯低于癌旁組織(肝炎組和肝硬化組)(P<0.05)。 3.Cks1mRNA的表達(dá)與原發(fā)性肝癌的病理分級(jí)、癌栓形成、腫瘤結(jié)節(jié)個(gè)數(shù)和AFP相關(guān)(P<0.05),而與患者的性別、年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小和HBV無關(guān)(P>0.05);Cks1蛋白的表達(dá)與原發(fā)性肝癌的病理分級(jí)
4、、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤結(jié)節(jié)個(gè)數(shù)和AFP相關(guān)(P<0.05),而與患者的性別、年齡、癌栓形成、腫瘤大小和HBV無關(guān)(P>0.05)。Cks2mRNA的表達(dá)與患者的年齡、病理分級(jí)和AFP相關(guān)(P<0.05),而與患者的性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、癌栓形成、腫瘤大小、結(jié)節(jié)個(gè)數(shù)和HBV無關(guān)(P>0.05);Cks2蛋白的表達(dá)與原發(fā)性肝癌的病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05),而與患者的性別、年齡、癌栓形成、結(jié)節(jié)個(gè)數(shù)、腫瘤大小、HBV和AFP無關(guān)(P>0.
5、05)。 4.p27kipl蛋白的表達(dá)與Cks1蛋白(r=0,412,P=0.006)和Cks2蛋白(r=-0.480,P=0.001)的表達(dá)水平均呈負(fù)相關(guān)。 結(jié)論: 1.實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)Cks1和Cks2的mRNA表達(dá)水平具有快速、特異、穩(wěn)定和準(zhǔn)確等特點(diǎn),為檢測(cè)臨床組織Cks1和Cks2基因的表達(dá)水平提供了有效的檢測(cè)手段。 2.原發(fā)性肝癌中Cks1和Cks2 mRNA和蛋白水平均有高表達(dá),且與腫
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