細(xì)胞質(zhì)胸苷激酶1在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的：
　　本文研究了細(xì)胞質(zhì)胸苷激酶1(thymidine kinase1，TK1)在原發(fā)性肝癌（primary hepatic carcinoma，PHC）中的表達(dá)情況，探討其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系及對(duì)PHC患者預(yù)后的臨床意義。
　　方法：
　　1.研究對(duì)象選擇2011年1月至2012年1月連云港市東方醫(yī)院門診和住院患者107例，其中PHC組33例，男性患者22例，女性患者11例，年齡（52.7±6.9）歲；肝硬化患者

2、組38例，男性患者22例，女性患者16例，年齡（53.7±7.2）歲；慢性肝炎組36例，男性患者25例，女性患者11例，年齡（41.8±6.7）歲；健康對(duì)照組35例，其中男性19例，女性16例，年齡(48.4±5.8)歲，為本院同期體檢健康者。對(duì)所有患者進(jìn)行電話隨訪，隨訪時(shí)間截止于2015年1月31日。
　　2.標(biāo)本的采集及處理分別空腹采取原發(fā)性肝癌組、肝硬化組、慢性肝炎組與健康對(duì)照組研究對(duì)象肘靜脈血4 ml，室溫靜止30min后

3、，以4000 r/min離心10 min，分離出血清進(jìn)行檢測(cè)；采用免疫印跡增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法與電化學(xué)發(fā)光法分別檢測(cè)血清TK1、AFP水平，所有試劑均為儀器配套試劑，所有操作均按照儀器和試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。
　　3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，正態(tài)分布的計(jì)量資料以(-x)±s表示，非正態(tài)分布計(jì)量資料采用中位數(shù)和四分位數(shù)[M（P25，P75）]表示，多組比較采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)，兩組間比較采用Man

4、n-Whitney U檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料比較采用?2檢驗(yàn)；采用Spearman相關(guān)分析檢驗(yàn)TK1與AFP的相關(guān)性；采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic，ROC）和Logistic回歸分析TK1、AFP單項(xiàng)與聯(lián)合檢測(cè)效能并確定其臨界值，ROC曲線下面積之間的比較采用Z檢驗(yàn)；采用Kaplan-Meier單因素和COX多因素分析，篩選出影響PHC患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　結(jié)果：

5、>　　1.PHC組血清TK1為32.66(1.03，121.33)pmol/L，肝硬化組為2.69(0.89，15.66) pmol/L，慢性肝炎組為1.16(0.59，3.69)pmol/L，健康對(duì)照組為1.02(0.39，1.69)pmol/L，經(jīng)Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，4組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H=89.6，P<0.05)；PHC組血清AFP為916.37(9.08，2221.75)ug/L，肝硬化組為9.27(3.12，

6、815.13)ug/L，慢性肝炎組為6.10(2.36，94.80)ug/L，健康對(duì)照組為3.50(1.67，8.90)ug/L，經(jīng)Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，4組間差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H=76.8，P<0.05)；經(jīng)Mann-Whitney檢驗(yàn)，PHC組分別其他三組比較，TK1水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=163.60、352.10、436.40，均P<0.05)；各組間AFP水平差異亦均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義((U=199.30、269.

7、70、538.10，均P<0.05)；通過(guò)Spearman相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)， PHC組患者血清TK1與AFP呈正相關(guān)（r=0.566，P<0.05）；
　　2. TK1的ROC下面積大于AFP ROC下面積(0.836 vs0.746)(Z=1.96，P<0.01)，并應(yīng)用ROC曲線確定TK1和AFP的臨界值分別為2.21pmol/L和32.27ug/L，在此臨界值下，TK1和AFP對(duì)PHC的敏感度分別為76.8％和60.9％，差異有

8、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.480，P<0.05)，特異度分別為91.5％和88.7%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=28.916，P＞0.05)；
　　3.TK1與 AFP聯(lián)合檢測(cè)診斷 PHC的ROC曲線下面積為0.935（95％CI，0.901-0.969)，高于胸苷激酶1和甲胎蛋白單項(xiàng)檢測(cè)時(shí)的ROC曲線下面積，兩者差異皆具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z＝2.532、4.791，均P<0.05）；聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度分別為91.3%、87.3%，聯(lián)

9、合檢測(cè)與單項(xiàng)檢測(cè)相比，可明顯提高原發(fā)性肝癌診斷的敏感度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=16.978、45.329，均P<0.05)；
　　4.原發(fā)性肝癌組中腫瘤細(xì)胞低分化患者胸苷激酶1水平明顯高于中/高分化患者，TNMⅢ+Ⅳ分期患者明顯高于Ⅰ+Ⅱ分期患者56.27(5，08,111.75)pmol/L比12.43(2.18，31.75) pmol/L，56.23(4.33，120.87) pmol/L比15.38(2.65，43.66)

10、 pmol/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而在按性別、年齡、腫瘤直徑、腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)、血管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Child-pugh分級(jí)情況的臨床病理特征分組的分布差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（U值分別為58.6、26.00、131.50、102.60、116.20、99.00、95.60，均P＞0.05)；
　　5.本組33例發(fā)性肝癌患者中，28例原發(fā)性肝癌患者術(shù)后獲得隨訪，隨訪率為84.85%，總體中位生存時(shí)間為19個(gè)月，總體平均生存時(shí)

11、間(20.1±3.9)月1年、2年、3年總體生存率分別為89.2%、78.3%、61.5%；血清TK1≥2.21 pmol/L的PHC患者1年、2年、3年生存率分別為62.3%、50.3%、32.1%，中位生存時(shí)間為10個(gè)月，平均生存時(shí)間為(11.7±3.3)月；血清TK1<2.21 pmol/L PHC患者1年、2年、3年生存率分別為96.3%、82.5%、71.1%，中位生存時(shí)間為22個(gè)月，平均生存時(shí)間為(21.3±3.7)月，兩組

12、之間生存率和生存時(shí)間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(?2=7.974、6.165，均P<0.05)；
　　6.單因素分析顯示低分化程度(OR，3.019；95%CI，1.287-7.082，P=0.011)、TNM分期≥Ⅲ期(OR，2.778；95%CI，1.221-6.321，P=0.015)、TK1≥2.21 pmol/L(OR，2.684；95%CI，0.498-0.940，P=0.019)與PHC患者的總體生存率顯著相關(guān)（P<0.05

13、）；
　　7.Cox模型多因素分析顯示TNM分期≥Ⅲ期(OR，3.721；95%CI，1.651-8.384，P=0.002)和TK1≥2.21 pmol/L(OR，1.560；95%CI，1.087-2.241，P=0.016)是影響原發(fā)性肝癌患者總體生存率的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P<0.05）；
　　結(jié)論：
　　1. PHC患者血清中TK1水平明顯高于非肝癌者，提示TK1可作為臨床中PHC輔助診斷指標(biāo)。
　　2. T

14、K1對(duì)PHC的診斷靈敏度優(yōu)于AFP，TK1與AFP聯(lián)合檢測(cè)可以顯著提高PHC篩查的靈敏度，有利于減少臨床中漏診情況的發(fā)生，但是特異度有所降低。
　　3. TK1水平與PHC的TNM分期和腫瘤細(xì)胞分化程度密切相關(guān)，提示TK1可能在PHC的發(fā)生、生長(zhǎng)過(guò)程中起著極其重要的作用。
　　4、TNM≥Ⅲ期和TK1≥2.21 pmol/L是影響原發(fā)性肝癌患者總體生存率的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，從而揭示TK1可作為原發(fā)性肝癌的診斷、療效監(jiān)測(cè)、預(yù)后評(píng)估