Plk1、Chk1-2在原發(fā)性肝癌組織及HepG2細胞中的表達及臨床意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究保羅樣激酶1(Polo-like kinase1,Plk1)、細胞周期檢測點激酶1、2(checkpoint kinase1/2,Chk1/2)三種在細胞周期調控過程及細胞周期檢測點機制中有重要作用的激酶在原發(fā)性肝癌組織與人肝癌細胞 HepG2中的表達情況,了解這三種激酶蛋白的表達與原發(fā)性肝癌之間的關系,以期為肝癌的生物基因治療提供理論依據。
  方法:(1)使用免疫組織化學二步法(Envision法)檢測40例原發(fā)性肝

2、癌組織及16例肝非腫瘤組織(正常肝組織8例,肝硬化組織8例)中Plk1、Chk1/2蛋白的表達。(2)培養(yǎng)后收集HepG2細胞并提取蛋白。(3)應用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定各組樣品的蛋白濃度。(4)利用蛋白免疫印記(Western-bloting)技術定性分析Plk1、Chk1/2蛋白在HepG2細胞中的表達情況。(5)用pHotoshop軟件測定灰度值進行定量分析,從而檢驗不同基因蛋白在HepG2細胞中表達的差異。
  結果

3、:(1)Plk1、Chk1/2蛋白在原發(fā)性肝癌組織中表達的陽性率分別57.5%、75.0%和22.5%,在肝非腫瘤組織中的陽性率分別為0%,25.0%和56.3%;Plk1和Chk1蛋白在原發(fā)性肝癌組織中的表達陽性率高于肝非腫瘤組織,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。Chk2在原發(fā)性肝癌組織中的表達陽性率低于肝非腫瘤組織,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(2)Plk1、Chk1/2蛋白在HepG2細胞中均有表達。(3)Plk1蛋白與

4、Chk1/2蛋白的相對表達量分別是:0.39±0.0226、0.08±0.0249、0.01±0.0066,且三者之間的差異均有統(tǒng)計學意義,其表達的順序依次為Plk1>Chk1>Chk2。
  結論:(1)Plk1、Chk1蛋白在原發(fā)性肝癌組織中表達上調,而 Chk2蛋白在原發(fā)性肝癌組織中表達下調。(2)Plk1、Chk1/2基因作為細胞周期調控中的重要激酶在HepG2細胞中均有表達,其表達順序為Plk1>Chk1>Chk2。(3

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