肝素對(duì)膿毒癥大鼠血清TNF-α、TF及TFPI的調(diào)控和凝血功能及肺損傷的影響.pdf

1、目的：
　　 觀察小劑量肝素(heparin)對(duì)內(nèi)毒素(lipopolysaccharide，LPS)誘導(dǎo)的大鼠膿毒癥時(shí)凝血功能的影響及血清中組織因子(tissuefactor，TF)及組織因子途徑抑制物(tissuefactorpathwayinhibitor，TFPI)、腫瘤壞死因子-α(tumornecrosisfactor-α，TNF-α)的變化。探討小劑量肝素對(duì)膿毒癥大鼠早期凝血功能及炎癥反應(yīng)的作用，并觀察肺組織的改變

2、，為膿毒癥新的臨床輔助治療提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
　　 方法：
　　 健康、雄性Wistar大鼠40只，隨機(jī)分為五組：
　　 對(duì)照組，生理鹽水1ml尾靜脈注射；
　　 LPS2h，6h組，LPS5mg/kg體重溶于生理鹽水1ml尾靜脈注射，建立大鼠膿毒癥模型；
　　 LPS+肝素2h，6h組：在按與內(nèi)毒素相同標(biāo)準(zhǔn)給LPS的同時(shí)給予肝素100U/kg體重，生理鹽水稀釋至1ml尾靜脈注射。
　　 觀

3、察各組大鼠一般狀況，在造模后2h，6h留取標(biāo)本，凝血儀測(cè)定凝血功能；酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)法檢測(cè)血清TF、TFPI、TNF-α的含量；光鏡下觀察各組大鼠肺組織病理變化，進(jìn)行比較。
　　 結(jié)果：
　　 1、一般狀態(tài)觀察：建立動(dòng)物模型后，對(duì)照組大鼠呼吸均勻，精神狀態(tài)良好；LPS組大鼠精神萎靡，寒戰(zhàn)，呼吸窘迫，口周發(fā)紺，6h組大鼠較2h組癥狀嚴(yán)重，且表現(xiàn)出對(duì)

4、外界刺激反應(yīng)淡漠等。LPS+肝素組大鼠活動(dòng)度明顯下降，眼睛微閉，呼吸急促，但較LPS各組表現(xiàn)輕微。
　　 2、PT、APTT的比較：與對(duì)照組相比，LPS2h組與LPS6h組PT及APTT的延長(zhǎng)差異顯著(P＜0.01)，LPS+肝素2h組與LPS+肝素6h組其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；LPS+肝素2h組與LPS2h組相比，以及LPS+肝素6h組與LPS6h組相比，PT及APTT延長(zhǎng)明顯改善(P＜0.05)；LPS+肝素6h

5、組與LPS+肝素2h組相比，指標(biāo)無差異(P＞0.05)。
　　 3、血清中TF的水平變化比較：LPS2h組與LPS6h組血清TF與對(duì)照組相比顯著升高(P＜0.05)，LPS+肝素2h組與LPS+肝素6h組與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；LPS+肝素2h組與LPS2h組、LPS+肝素6h組與LPS6h組相比血清TF明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 4、血清中TFPI的水平變化比較：與對(duì)照組相

6、比，各組血清TFPI均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；LPS+肝素2h組與LPS2h組、LPS+肝素6h組與LPS6h組相比血清TFPI明顯升高，有顯著差異(P＜0.05)。
　　 5、血清中TNF-α的水平變化比較：LPS組、LPS+肝素組與對(duì)照組相比，血清TNF-α均增高(P＜0.05)，LPS+肝素2h組與LPS2h組、LPS+肝素6h組與LPS6h組相比，血清TNF-α水平明顯降低(P＜0.05)。
　　

7、 6、肺組織大體觀比較：觀察肺組織表面大體形態(tài)，對(duì)照組大鼠肺組織表面呈粉紅色，無出血點(diǎn)；LPS各組肺組織體積明顯增大，2h組可見點(diǎn)狀的肺出血，6h組可見肺部彌漫性的出血點(diǎn)及明顯肺水腫；LPS+肝素各組大鼠肺組織明顯水腫，可見局灶性點(diǎn)片狀出血，較LPS各組程度均較輕。
　　 7、病理片對(duì)照：對(duì)照組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)清晰、完整，肺泡壁薄、光滑，肺泡間隔均勻一致；LPS2h組大鼠可見肺水腫，肺泡腔變窄，部分肺泡壁增厚，肺泡壁毛細(xì)血管擴(kuò)張，

8、可見中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)；LPS+肝素2h組大鼠肺組織損傷較LPS2h組減輕，肺泡腔清晰，肺泡隔輕度水腫，炎癥病變輕，肺充血，肺間質(zhì)輕度水腫，可見小灶狀炎細(xì)胞浸潤(rùn)；LPS6h組大鼠肺組織損傷嚴(yán)重，可見肺泡腔變窄或消失，肺間質(zhì)增寬，腔內(nèi)可見炎細(xì)胞明顯增多，肺泡壁明顯增厚，肺充血，肺間質(zhì)水腫，炎細(xì)胞彌漫性浸潤(rùn)，并可見肺氣腫伴局灶性肺不張；LPS+肝素6h組大鼠肺泡結(jié)構(gòu)存在，肺泡腔變窄，腔內(nèi)可見炎細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡壁增厚，肺充血，肺間質(zhì)水腫，灶狀炎細(xì)胞