腦室內(nèi)注射堿性成纖維細(xì)胞生成因子治療大鼠創(chuàng)傷性腦損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)和科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，顱腦損傷的發(fā)生率也不斷增高，其傷后致殘率和致死率位居全身各器官損傷之首。目前的藥物、理療等治療手段尚難達(dá)到理想療效，因此如何使顱腦損傷后遺留的神經(jīng)功能障礙得以恢復(fù)始終困擾著神經(jīng)科醫(yī)生。
　　神經(jīng)干細(xì)胞(Neuralstemcells，NSCs)的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用，為中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的治療提供的全新的思路。神經(jīng)干細(xì)胞具有再生能力以及向多種神經(jīng)細(xì)胞分化的潛能,即在適當(dāng)?shù)臈l件下能夠進(jìn)行增殖，并可以向特定的方向進(jìn)行

2、誘導(dǎo)和分化。目前應(yīng)用神經(jīng)干細(xì)胞治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷已形成兩種思路：1.“替代治療”，即移植外源性干細(xì)胞，2.“補(bǔ)充治療”，即激活內(nèi)源性干細(xì)胞。但是外源性神經(jīng)干細(xì)胞來源有限、取材困難，移植后存在免疫排斥反應(yīng)且受到倫理及法律的限制。而內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞具有來源穩(wěn)定可靠、無倫理道德問題、無免疫排斥反應(yīng)、無致瘤性等優(yōu)勢(shì)。然而內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞自身的增殖與分化是有限的，仍不足以修復(fù)神經(jīng)損傷。所以我們可以通過干預(yù)來促進(jìn)和增強(qiáng)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的增殖和分化

3、，使之能更好地修復(fù)神經(jīng)損傷。
　　堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是一種生物活性較強(qiáng)的促分裂原，與胚胎發(fā)育和成體組織的自身穩(wěn)定性有關(guān)，具有促進(jìn)血管形成，改善微循環(huán)，促進(jìn)受損神經(jīng)、血管、皮膚等修復(fù)和再生的功能，特別對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)有十分廣泛的作用。bFGF也是一種廣譜的神經(jīng)營養(yǎng)因子，能夠促進(jìn)神經(jīng)元功能的恢復(fù)；對(duì)衰老和被破壞的神經(jīng)細(xì)胞有不同程度的修復(fù)和保護(hù)作用。
　　本實(shí)

4、驗(yàn)通過對(duì)腦外傷模型大鼠腦室內(nèi)注射bFGF，觀察模型大鼠內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的增殖情況，評(píng)價(jià)大鼠肢體功能的恢復(fù)情況，并研究了兩者的相關(guān)性。為通過激活內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞治療創(chuàng)傷性腦外傷提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。目的探討腦室注射堿性成纖維細(xì)胞生長因子對(duì)創(chuàng)傷性腦外傷大鼠的治療作用，為臨床使用bFGF通過腦室內(nèi)注射激活內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞治療TBI提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法24只成年SD大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為治療組和對(duì)照組，每組12只；采用改良的Feeney氏自由落體撞擊的方

5、法建立大鼠創(chuàng)傷性腦外傷模型，于致傷后24h治療組大鼠給予腦室注射bFGF，對(duì)照組大鼠給予腦室注射等量的生理鹽水；采用行為測(cè)試試驗(yàn)（前置放置試驗(yàn)、平衡試驗(yàn)）評(píng)分觀察肢體功能恢復(fù)；致傷后1～14d，大鼠每天在同一時(shí)間段對(duì)進(jìn)行行為測(cè)試，直至處死；采用免疫組化法，以5-溴脫氧嘧啶尿苷(BrdU)標(biāo)記神經(jīng)干細(xì)胞，觀察并比較兩組大鼠致傷后第3、7、14天側(cè)腦室室管膜下區(qū)(SVZ)、海馬齒狀回顆粒細(xì)胞下層（DG/SGZ）及損傷區(qū)域BrdU陽性細(xì)胞的表

6、達(dá)情況。結(jié)果致傷后兩組大鼠損傷對(duì)側(cè)肢體外展不能，肌張力減低，行走不穩(wěn)，向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈或傾倒。兩組間的前肢放置試驗(yàn)和平衡試驗(yàn)評(píng)分差異有統(tǒng)計(jì)意義(P≤0.05)，治療組前肢放置試驗(yàn)評(píng)分在第3-12天平衡試驗(yàn)在第3-11天的評(píng)分低于對(duì)照組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05)。與對(duì)照組相比，治療組大鼠雙側(cè)SVZ、DG/SGZ和損傷區(qū)域出現(xiàn)的BrdU陽性細(xì)胞數(shù)顯著增多(P≤0.05)。兩組大鼠損傷側(cè)BrdU陽性細(xì)胞數(shù)均高于損傷對(duì)側(cè)(P≤0.05)。