轉(zhuǎn)TrkC神經(jīng)干細胞聯(lián)合膠原支架對創(chuàng)傷性腦損傷大鼠模型治療作用的實驗研究.pdf

1、第一部分:轉(zhuǎn)TrkC神經(jīng)干細胞聯(lián)合膠原支架對創(chuàng)傷性腦損傷大鼠模型治療作用的實驗研究
　　研究背景和目的:
　　外傷性腦損傷（traumatic brain injury，TBI）會造成嚴重的神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙，目前仍沒有有效的臨床治療能逆轉(zhuǎn)TBI病理進程。近年來很多臨床前研究表明干細胞移植治療在動物TBI中顯示出良好的效果。另一些研究認為NT-3和生物支架能促進神經(jīng)干細胞增殖及神經(jīng)元分化。本研究嘗試用神經(jīng)干細胞聯(lián)合結合NT-3

2、的膠原材料治療中度TBI大鼠，重點驗證干細胞及膠原材料聯(lián)合移植的可行性，并觀察神經(jīng)干細胞在體內(nèi)增殖和分化成神經(jīng)元的情況。
　　方法:
　　成年雄性SD大鼠，體重250 g，用Feeney自由落體打擊法造成中度TBI。將大鼠隨機分成四組:①TrkC-NSC+NT-3-collage組;②NSC+ collage組;③NSC組;④生理鹽水組，每組6只大鼠。術后第7天移植神經(jīng)干細胞和膠原支架至大鼠腦損傷灶。用改良神經(jīng)功能缺失評分(

3、mNSS)評價各組大鼠干細胞移植后1、7、14、21及28 d的行為學表現(xiàn)。細胞移植前1d以及細胞移植后28d行micro-PET評估損傷灶代謝情況;細胞移植前2d以及細胞移植后27d行micro-MRI評估顱內(nèi)結構;移植后2周行免疫組化GFP/bax/bcl-2/nestin/ki-67/βⅢ Tubulin。
　　結果:
　　(1) TrkC基因重組腺病毒轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細胞(NSCs)的最適宜感染復數(shù)為100;轉(zhuǎn)TrkC神經(jīng)

4、干細胞在體外TrkC基因明顯過表達。
　　(2)神經(jīng)干細胞同膠原支架在體外共培養(yǎng)5d，熒光顯微鏡及掃描電鏡均顯示神經(jīng)干細胞同膠原支架附著良好，細胞間有突起連接。
　　(3)在細胞移植14以后，TrkC-NSCs+ NT-3-collagen組和NSCs+ collage組行為學評分(mNSS)均比對照組明顯低(p＜0.05)，TrkC-NSCs+ NT-3-collagen組和NSCs+ collage組之間評分無統(tǒng)計學差異

5、(p＞0.05)。
　　(4)大鼠腦外傷后4周，各組損傷灶代謝活性均降低，TrkC-NSCs+ NT-3-collagen組損傷灶代謝活性最高。而NSCs+collage組損傷灶代謝活性也明顯較對照組/單純NSCs組高(p＜0.05)。
　　(5)免疫組化結果:TrkC-NSCs+ NT-3-collagen組GFP主要分布在損傷灶及周圍中，小部分向腦深部遷移;TrkC-NSCs+ NT-3-collagen組損傷灶周圍bc

6、l-2/nestin/ki-67/βⅢTubulin等染色陽性率均比對照組多。
　　結論:
　　實驗論證了TrkC-NSCs+ NT-3-collagen在體外培養(yǎng)的可行性。對于遭受中度TBI的大鼠，TrkC-NSCs+ NT-3-collagen聯(lián)合移植治療有效，可能同collage和NT-3促進神經(jīng)干細胞增殖及分化成神經(jīng)元有關。
　　第二部分:樹狀突細胞為基礎的主動免疫療法治療膠質(zhì)母細胞瘤的系統(tǒng)綜述
　　研究

7、背景和目的:
　　多形性膠質(zhì)母細胞瘤(GBM)是最常見的原發(fā)惡性腦瘤，常規(guī)治療后預后較差，因此有必要探索新的治療手段來改善患者的預后。免疫療法，尤其是樹突狀細胞(DC)疫苗療法近幾年來發(fā)展迅速，有成為GBM患者新的輔助治療的潛力。我們對目前發(fā)表的相關臨床試驗進行了系統(tǒng)綜述。本研究的目的是探索DC疫苗治療有效性和安全性，主要關注并發(fā)癥、中位數(shù)總生存期(mOS)、中位無進展生存期(mPFS)和生活質(zhì)量等方面。
　　方法:

8、　　檢索Medline，Pubmed，CMCC，Google Scholar，Embase，Ovid，Cochrane等，追查所有納入研究的參考文獻，檢索年限均從建庫檢索到2015年4月，將利用DC疫苗主動免疫治療膠質(zhì)母細胞瘤形成療效及安全性對比的臨床研究(CT)納入本項研究。評估參數(shù)為免疫反應、影像學表現(xiàn)、中位PFS和中位OS。并發(fā)癥分為手術相關并發(fā)癥及疫苗相關并發(fā)癥。
　　結果:
　　本綜述中共納入19個研究，共包含35