左甲狀腺素和維生素E對(duì)甲減大鼠海馬氧化應(yīng)激水平和細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：通過(guò)研究甲狀腺素(T4)、維生素E(VitE)以及二者聯(lián)合治療對(duì)甲狀腺功能減退大鼠海馬組織氧化應(yīng)激水平和細(xì)胞凋亡的影響,進(jìn)一步探討甲減海馬損傷的發(fā)生機(jī)制及甲減的治療方法。
　　方法：將SD雄性大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(control組)、甲減組(PTU組)、甲狀腺激素治療組(PTU+T4組)、VitE治療組(PTU+VitE組)、甲狀腺激素+VitE聯(lián)合治療組(PTU+VitE+T4組)。對(duì)照組飲用自來(lái)水,其它各組飲用含0.0

2、5％丙硫氧嘧啶(propylthiouracil,PTU)的自來(lái)水,28d后每天早8點(diǎn)PTU+T4組和PTU+T4+VitE組按2μg/100g左甲狀腺素(L-T4)灌胃,其余各組按等量生理鹽水灌胃;晚6點(diǎn)PTU+VitE組和PTU+T4+VitE組按20mg/100g維生素E(VitE)膠丸灌胃,其余各組按等量植物油灌胃,連續(xù)4周。期間除正常對(duì)照組仍飲用自來(lái)水外,其它各組仍飲用含0.05%PTU的自來(lái)水。8周后測(cè)定血清中T3、T4、T

3、SH,采用westernblot(WB,免疫印跡)方法獲得顯影條帶,對(duì)條帶進(jìn)行光密度分析,檢測(cè)大鼠海馬組織NADPH氧化酶(NADPHOxidase,)及超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)與內(nèi)參GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase,甘油醛-3-磷酸脫氫酶)的條帶光密度值的比值間接反映NADPH氧化酶及SOD的表達(dá)水平,應(yīng)用末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(

4、terminaldeoxynucleotidyltransferase-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)檢測(cè)海馬細(xì)胞凋亡。采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,所有數(shù)據(jù)均以X—±S表示,兩組間比較采用單因素方差分析(one-factoranalysisofvariance,ANOVA),海馬組織氧化應(yīng)激指標(biāo)與凋亡指數(shù)(apoptosisindex,AI)之間采用線性相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：①與

5、Control(正常對(duì)照)組比較,PTU組、VitE組T3、T4水平明顯降低,TSH顯著升高(p<0.05);與PTU組比較,PTU+T4組、PTU+T4+VitE組T3、T4水平明顯升高,TSH顯著降低(p<0.05);PTU組與PTU+VitE組T3、T4、TSH水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)。②與Control組比較,PTU組及PTU+T4組海馬組織SOD表達(dá)水平顯著降低(p<0.05),PTU組海馬組織NADPH氧化酶表達(dá)水平

6、顯著升高(p<0.05),其余各組之間統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)顯著差異(P>0.05);與PTU組比較,PTU+VitE組及PTU+T4+VitE組海馬組織SOD表達(dá)水平顯著升高,(p<0.05),PTU+T4組、PTU+VitE組及PTU+T4+VitE組海馬組織NADPH氧化酶表達(dá)水平顯著降低(p<0.05)。③與Control組比較,PTU組、PTU+VitE組海馬細(xì)胞AI顯著升高(p<0.05);與PTU組比較,PTU+T4組、PTU+T4+V