血管緊張素Ⅱ通過(guò)氧化應(yīng)激途徑對(duì)大鼠胰島β細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：首先探討血管緊張素Ⅱ的不同濃度及作用不同時(shí)間對(duì)胰島β細(xì)胞的影響。進(jìn)一步研究血管緊張素Ⅱ與大鼠胰島β細(xì)胞凋亡之間的關(guān)系，及血管緊張素Ⅱ受體阻斷劑是否對(duì)胰島細(xì)胞具有保護(hù)作用。
　　方法：一、將體外環(huán)境培養(yǎng)的RIN-m細(xì)胞隨機(jī)分為5組：（1）正常對(duì)照組（培養(yǎng)基中不含AngⅡ）；（2）AngⅡ0.1μmol·L-1組；（3）AngⅡ1.0μmol·L-1組；（4）AngⅡ10.0μmol·L-1組；（5）調(diào)零組。各組分別培養(yǎng)24h、

2、48h、72h后，應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)不同濃度AngⅡ及作用不同時(shí)間的細(xì)胞增值活性；二、將體外培養(yǎng)的RIN-m細(xì)胞隨機(jī)分為3組：（1）正常對(duì)照組；（2）AngⅡ10μmol·L-1組；（3）AngⅡ抑制劑（氯沙坦）預(yù)處理組。培養(yǎng)72h后收集細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞凋亡情況；活性氧檢測(cè)試劑盒測(cè)定細(xì)胞內(nèi)ROS的水平；采用real-time－PCR測(cè)定細(xì)胞NF-KBp65mRNA的表達(dá)水平，western-blot測(cè)定NF-KBp65和p-P

3、38MAPK蛋白質(zhì)的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.不同濃度的AngⅡ及不同作用時(shí)間的增殖率比較：同一時(shí)間，隨著AngⅡ濃度的增加，胰島細(xì)胞的增殖率降低（P＜0.05)；同一濃度，隨著時(shí)間的增加，胰島β細(xì)胞的增殖率降低(P＜0.05)。
　　2.AngⅡ與胰島細(xì)胞凋亡的關(guān)系：與正常組相比，AngⅡ組細(xì)胞凋亡率和ROS含量增加(P＜0.05)；與AngⅡ組相比，AngⅡ抑制劑組細(xì)胞凋亡率和ROS含量減少(P＜0.05)。

4、
　　3.AngⅡ誘導(dǎo)胰島細(xì)胞凋亡的機(jī)制：與正常組相比，AngⅡ組細(xì)胞NF-KBp65mRNA表達(dá)和NF-KBp65、p-P38MAPK蛋白表達(dá)增加(P＜0.05)；與AngⅡ組相比，AngⅡ抑制劑組細(xì)胞NF-KBp65mRNA表達(dá)和NF-KBp65、p-P38MAPK蛋白表達(dá)降低(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.隨著AngⅡ濃度及時(shí)間的增加，胰島β細(xì)胞的增殖率降低。
　　2.AngⅡ通過(guò)誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞內(nèi)R