腫瘤抑制基因RASSF1A、p16甲基化與人宮頸癌HeLa細(xì)胞凋亡相關(guān)性的研究.pdf

1、目的:檢測人宮頸癌Hela 細(xì)胞中RASSF1A、p16 基因甲基化的狀況，研究在人宮頸癌Hela 細(xì)胞凋亡過程中RASSF1A，p16 基因甲基化的變化情況，探討腫瘤細(xì)胞凋亡與抑癌基因甲基化的相關(guān)性，并尋找新的去甲基化藥物。 方法: 1)應(yīng)用甲基化特異性PCR 法（Methylation-specific PCR，MSP）檢測人宮頸癌HeLa 細(xì)胞及其凋亡過程中RASSF1A，p16 基因啟動子區(qū)5’CpG 島的甲基化狀況。2

2、)應(yīng)用天花粉蛋白誘導(dǎo)HeLa 細(xì)胞凋亡構(gòu)建凋亡模型, 對其進行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察， MTT 法檢測天花粉蛋白對HeLa 細(xì)胞增殖抑制的影響，流式細(xì)胞儀檢測天花粉蛋白對HeLa 細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用. 結(jié)果: 1)腫瘤抑制基因RASSF1A, p16 在人宮頸癌Hela 細(xì)胞異常甲基化。2)經(jīng)天花粉蛋白處理（20ug/ml，48 小時）后，HeLa 細(xì)胞生長明顯受抑,流式細(xì)胞儀直方圖出現(xiàn)明顯的亞二倍體峰，RASSF1A，p16 基因啟動