α-硫辛酸對高脂飲食去卵巢肥胖大鼠海馬炎癥反應(yīng)及BDNF水平的影響.pdf

1、研究目的:
　　 肥胖是一種慢性炎癥，肥胖患者尤其是絕經(jīng)后肥胖女性發(fā)生胰島素抵抗、代謝綜合征及認(rèn)知缺陷的風(fēng)險增加，α-硫辛酸具有抗炎及抗氧化作用，對阿爾茲海默病病人具有神經(jīng)保護作用。本論文采用對大鼠進行去卵巢術(shù)并給予高脂飲食喂養(yǎng)的方法復(fù)制絕經(jīng)后肥胖模型，探討去卵巢聯(lián)合高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖大鼠血脂、血清胰島素抵抗與海馬組織炎癥反應(yīng)及認(rèn)知相關(guān)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)水平的變化，同時觀察α-硫辛酸對其改變的影響。
　　 研

2、究方法:
　　 1.動物處理40只3月齡Wistar雌鼠按體重隨機分成4組:假手術(shù)普通飲食(SHAM+ND)組;假手術(shù)高脂飲食(SHAM+HFD)組;去卵巢高脂飲食(OVX+HFD)組;α-硫辛酸+去卵巢高脂飲食(OVX+HFD+α-LA)組。除假手術(shù)組外，其余組大鼠行雙側(cè)卵巢切除術(shù)，并給予相應(yīng)普通或高脂飼料喂養(yǎng)，同時給予α-硫辛酸溶液(200mg·kg-1·d-1)或相應(yīng)劑量羧甲基纖維素鈉溶液灌胃，每周稱量大鼠體重。
　

3、　 2.標(biāo)本采集干預(yù)3月后，取股動脈血5ml，3000rpm4℃條件下離心15min，取上清分裝于相對無菌的EP管中，-80℃冰箱保存。相對無菌條件下，在冰上將大鼠開顱取腦，迅速分離兩側(cè)海馬組織，放于無菌凍存管中，液氮保存。
　　 3.指標(biāo)測量方法放免法檢測血清E2水平;酶光度比色法測定血清中TC、TG含量;直接測定法檢測血清LDL-C、HDL-C水平;葡萄糖氧化酶法檢測血清FBG含量;ELISA法檢測血清胰島素、瘦素、脂聯(lián)素

4、含量;RT-PCR方法測海馬組織IL-6、TNF-α、BDNFmRNA表達;ELISA法檢測海馬組織IL-6、TNF-α、BDNF及Aβ1-42蛋白表達水平;蛋白免疫印跡法檢測海馬組織中BDNF蛋白含量。
　　 實驗結(jié)果:
　　 1.分別與SHAM+ND組、SHAM+HFD組比較，OVX+HFD組大鼠體重明顯增加，血清E2、脂聯(lián)素水平降低，血清TC、瘦素含量升高，HOMA-IR明顯增加(P＜0.05或P＜0.01);α-

5、硫辛酸干預(yù)組大鼠體重明顯降低，血清TC、TG、LDL-C、瘦素含量及HOMA-IR降低，血清脂聯(lián)素、HDL-C水平明顯升高，與OVX+HFD組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.01)。
　　 2.分別與SHAM+ND組、SHAM+HFD組比較，OVX+HFD組大鼠海馬組織中炎癥因子IL-6、TNF-αmRNA及蛋白表達水平均明顯增加，海馬組織BDNFmRNA及蛋白表達降低，且Aβ1-42在海馬組織中的沉積顯著增加(P＜0

6、.05或P＜0.01);OVX+HFD+α-LA組大鼠海馬組織中炎癥因子IL-6、TNF-αmRNA及蛋白表達水平明顯降低，海馬組織BDNFmRNA及蛋白含量顯著增加，且海馬組織中Aβ1-42的沉積減輕(P＜0.05或P＜0.01)。
　　 實驗結(jié)論:
　　 1.高脂飲食聯(lián)合去卵巢明顯降低大鼠血清E2水平，增加大鼠體重，引起高膽固醇血癥及高胰島素血癥，增加大鼠血清瘦素水平，降低血清脂聯(lián)素含量，激活大鼠海馬組織炎癥反應(yīng)，降

7、低海馬組織中具有神經(jīng)保護作用的BDNF的表達，加重Aβ1-42在大鼠海馬組織中的沉積。
　　 2.α-硫辛酸可明顯降低高脂飲食聯(lián)合去卵巢術(shù)誘導(dǎo)的肥胖大鼠的體重，改善血脂異常，減輕肥胖誘導(dǎo)的胰島素抵抗，降低血清瘦素水平，升高血清脂聯(lián)素含量，減輕大鼠海馬組織炎癥反應(yīng)及Aβ1-42的沉積，增加海馬組織BDNF的表達，加強BDNF對海馬的神經(jīng)保護作用。
　　 研究意義:
　　 采用卵巢切除術(shù)與高脂飲食的方法誘導(dǎo)雌激素缺乏