T4噬菌體誘導(dǎo)腫瘤相關(guān)巨噬細胞M1型再極化作用的研究.pdf

1、目的：
　　觀察T4噬菌體對M2型巨噬細胞向抑制腫瘤M1型再極化的誘導(dǎo)作用，并檢測再極化巨噬細胞誘導(dǎo)小鼠Lewis肺癌細胞凋亡和抑制腫瘤細胞侵襲作用效果。
　　方法：
　　小鼠巨噬細胞RAW264.7經(jīng)白細胞介素-4(IL-4)誘導(dǎo)為替代性活化巨噬細胞（M2型）;RT-PCR法檢測IL-4誘導(dǎo)極化，以及T4噬菌體再極化后巨噬細胞中IL-12、TNF-α、Arg-1、TGF-β、IL-10和iNOS基因mRNA水平變化;

2、Western-blot方法檢測巨噬細胞內(nèi)iNOS和Arg-1蛋白表達變化;流式細胞技術(shù)和transwell法分別檢測T4噬菌體再極化巨噬細胞誘導(dǎo)小鼠Lewis肺癌細胞凋亡和抑制肺癌細胞侵襲作用效果。
　　結(jié)果：
　　RAW264.7細胞經(jīng)IL-4處理后被誘導(dǎo)成為M2型巨噬細胞，iNOS和IL-12表達分別下降了2.5和6.2倍，而Arg-1和IL-10表達分別增加了161.2和120.3倍。M2型巨噬細胞經(jīng)野生型和突變型T

3、4噬菌體處理，相關(guān)細胞因子表達呈現(xiàn)M1型特征，其中突變型T4噬菌體在誘導(dǎo)巨噬細胞相關(guān)細胞因子表達改變及再極化的作用顯著強于野生型噬菌體。野生型和突變型噬菌體誘導(dǎo)M1再極化的巨噬細胞引起小鼠Lewis肺癌細胞凋亡比率較M2型巨噬細胞顯著增高(18.4±1.71和21.4±1.34vs4.68±0.56，p＜0.01)的同時，顯著抑制了肺癌細胞的侵襲性(43.8±7.51和23.2±4.33vs177.5±12.33,p＜0.01)。