一氧化氮和谷氨酸在內(nèi)皮素-1誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡中的作用.pdf

1、　　目的：證實內(nèi)皮素(ET)-1(2X10-5M)誘導(dǎo)培養(yǎng)大鼠大腦皮層神經(jīng)元凋亡的作用；該濃度ET-1有無刺激培養(yǎng)大鼠大腦皮層神經(jīng)元釋放內(nèi)源性一氧化氮(NO)和谷氨酸的作用；了解NO、谷氨酸在該濃度ET-1誘導(dǎo)培養(yǎng)大鼠大腦皮層神經(jīng)元凋亡中的作用和地位。
　　方法：神經(jīng)元培養(yǎng)取自乳鼠大腦皮質(zhì)細胞,培養(yǎng)5天后分用于實驗。實驗分四組：對照組(空白)、ET-1組(2X10-5M)、ET-1+L-NAME(左旋精氨酸甲酯,NO合成抑制劑,1

2、00mM)組和ET-1+APV組(谷氨酸受體拮抗劑,100μM),繼續(xù)培養(yǎng)24小時。收集細胞用流式細胞儀定量檢測凋亡率；收集培養(yǎng)上清液用硝酸還原酶法檢測細胞上清液中的NO濃度,高壓液相法檢測谷氨酸濃度。統(tǒng)計學(xué)處理采用雙側(cè)t檢驗。
　　結(jié)果：ET-1(20nM)處理后24小時,培養(yǎng)大鼠大腦皮層神經(jīng)元凋亡率顯著高于對照組(P<0.001)。L-NAME和APV可分別明顯阻斷了ET-1誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡的作用,與ET-1組比較,凋亡率降幅分

3、別為40%(P<0.05)和80%(P<0.001)。其中APV阻斷ET-1誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡的作用較L-NAME更明顯(P<0.001)。經(jīng)ET-1處理后24h,神經(jīng)元培養(yǎng)液中NO和谷氨酸濃度均較對照組顯著高(P<0.001)。而L-NAME完全抑制了ET-1引起的培養(yǎng)液中NO的升高。
　　結(jié)論：ET-1(20nM)有誘導(dǎo)培養(yǎng)大鼠大腦神經(jīng)元凋亡的作用；該作用與ET-1刺激培養(yǎng)大鼠大腦神經(jīng)元(合成和)釋放內(nèi)源性谷氨酸和NO增加有關(guān)；N