低氧誘導的大鼠類焦慮樣行為可能與上調(diào)的PVN、CeA和LC的CRFR1和去甲腎上腺素受體表達有關(guān).pdf

1、背景和目的
　　HPA（Hypothalamic-pituitary-adrenal）軸作為機體最為重要的應(yīng)激反應(yīng)系統(tǒng)，在應(yīng)激反應(yīng)中發(fā)揮重要作用，用以維持機體的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。應(yīng)激上調(diào)促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素CRF(Corticotropin releasing factor)和CRFR1(Corticotropin-releasing factor receptor1)的表達，而CRF和CRFR1的過表達是焦慮產(chǎn)生的重要機制。去甲腎

2、上腺素NE（Norepinephrine）是CRF和CRFR1的上游調(diào)節(jié)因素之一， NE及其受體的表達受到應(yīng)激的影響，從而進一步調(diào)節(jié)CRF和CRFR1的表達。低氧能夠引發(fā)機體產(chǎn)生一系列的生理的變化，我們實驗室前期研究顯示妊娠期間歇低氧誘導子代雄性大鼠產(chǎn)生類焦慮樣行為，并證明其原因是子代PVN(Paraventricular nucleus)區(qū)CRFR1的高表達引起。本論文是研究連續(xù)低氧應(yīng)激是否會誘導成年大鼠產(chǎn)生類焦慮樣行為，在類焦慮樣行

3、為產(chǎn)生過程中下丘腦PVN區(qū)、邊緣系統(tǒng)杏仁核CeA(Central nucleus of amygdale)以及腦干藍斑區(qū)LC(Locus coeruleus)CRF和CRFR1發(fā)揮什么樣的作用，NE及其受體是否參與了低氧誘導的成年大鼠產(chǎn)生類焦慮樣行為。
　　實驗設(shè)計和方法
　　本研究利用低氧艙模擬高原5000米低氧環(huán)境，研究5000米5天連續(xù)低氧對成年雄性大鼠行為的影響，通過開放場實驗、高架十字迷宮實驗檢測5000米5天連續(xù)

4、低氧是否會造成成年雄性大鼠類焦慮樣行為的產(chǎn)生，利用實時定量PCR方法檢測大鼠下丘腦PVN區(qū)、CeA區(qū)和LC區(qū)CRF、CRFR1、NE受體α1、α2、β1、β2、NE合成相關(guān)酶酪氨酸羥化酶TH(Tyrosine hydroxylase)和多巴胺-β-羥化酶DBH(Dopamine-beta-hydroxylase的基因表達水平是否發(fā)生變化。
　　PVN核團注射siRNA的方法阻斷目的基因表達，進一步檢測阻斷CRFR1、α1A和β2后

5、對大鼠類焦慮樣行為的影響。探討CRFR1、α1A和β2受體在低氧誘導的類焦慮樣行為中的作用。
　　實驗結(jié)果
　　1.5000米5天連續(xù)低氧不影響成年雄性大鼠在開放場中的行為。
　　2.5000米5天連續(xù)低氧誘導成年雄性大鼠產(chǎn)生類焦慮樣行為。低氧處理組大鼠在明暗箱實驗中，進入暗箱的潛伏時間明顯縮短，停留在暗箱的時間也明顯減少，但動物的穿梭次數(shù)無明顯變化。低氧處理組大鼠在高架十字迷宮中表現(xiàn)出總穿梭次數(shù)減少、進入閉合臂及開放

6、臂的次數(shù)均明顯減少，停留在開放臂中的時間也明顯減少。
　　3.5000米5天連續(xù)低氧刺激下丘腦PVN區(qū)CRF和CRFR1 mRNA表達，增加α1型受體mRNA表達，β1型和β2型受體mRNA表達，同時也明顯增加了THmRNA表達。
　　4.5000米5天連續(xù)低氧上調(diào)邊緣系統(tǒng)杏仁核CeA區(qū)CRFR1 mRNA表達，也上調(diào)α1型、β1型和β2型受體mRNA表達。但不影響CRF和α2型受體mRNA表達，TH mRNA表達量也沒有變

7、化。
　　5.5000米5天連續(xù)低氧上調(diào)腦干藍斑區(qū)LC區(qū)CRFR1 mRNA表達、α1、β1和β2型受體mRNA表達，也明顯增加NE合成相關(guān)酶TH和DBH的mRNA水平，但不影響CRF mRNA的表達。
　　6.低氧誘導的雄性成年大鼠類焦慮樣行為可能與上調(diào)的CRFR1受體有關(guān)。
　　小結(jié)
　　5000米5天連續(xù)低氧誘導成年雄性大鼠產(chǎn)生類焦慮樣行為，上調(diào)大腦PVN、CeA及LC區(qū)的CRF、CRFR1及NE的合成酶及