合歡皮中總皂苷的提取工藝優(yōu)化及其抑制血管生成的藥效學(xué)初步研究.pdf

1、抗新生血管生長(zhǎng)治療惡性腫瘤的策略已被肯定，圍繞血管形成關(guān)鍵要素內(nèi)皮細(xì)胞的藥物研發(fā)頗受重視。本文以具有抑制內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)作用的中藥合歡皮中總皂苷類(lèi)成分為研究對(duì)象，以干物質(zhì)得率，總皂苷含量，及總皂苷提取物對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的生物活性為指標(biāo)，優(yōu)化合歡皮中總皂苷的提取工藝參數(shù)，并進(jìn)行藥效學(xué)的初步探討。
　　 論文建立了合歡皮總皂苷定量分析的紫外分光度法：以齊墩果酸為對(duì)照品，酸化并定容，測(cè)定溶液OD560。該方法操作簡(jiǎn)單、通量高、結(jié)果穩(wěn)定，重復(fù)性好

2、，加樣回收率為107.86％。
　　 優(yōu)化得到合歡皮中總皂苷的工藝路線為：合歡皮藥材以60倍量(v/w)的70％乙醇加熱回流2.5 h提取2次(80℃)，合并回流液，用D101大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行分離(柱徑比1∶5)，分段洗脫濃度為30％、70％、95％乙醇溶液，洗脫流速為1.5 mL/min，收集其中70％乙醇洗脫流份，干燥后即為合歡皮的總皂苷提取物粉末。所得總皂苷提取物的提取率約為3％，比未優(yōu)化提取率提高2倍，總皂苷含量約為63

3、％。
　　 總皂苷提取物的藥效學(xué)研究初步發(fā)現(xiàn)，該提取物具有顯著抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的活性(IC50為1.5μg/mL)，相對(duì)于合歡皮水煎液的活性提高了20倍，相對(duì)未優(yōu)化工藝提取物的活性提高7倍；流式細(xì)胞分析顯示細(xì)胞周期阻滯在亞G0/G1期，高劑量干預(yù)可引起血管內(nèi)皮細(xì)胞出現(xiàn)壞死的現(xiàn)象。
　　 本文建立以合歡皮藥材提取率、總皂苷含量，提取物生物活性為指標(biāo)的合歡皮總皂苷提取工藝，提取物為抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的有效部位，為申報(bào)以