抗生素對(duì)新生大鼠腸道菌群及腸道免疫發(fā)育影響的研究.pdf

1、目的:通過(guò)建立動(dòng)物模型，研究口服抗生素對(duì)新生大鼠腸道菌群的變化及腸道免疫發(fā)育的影響。 方法:選用50只7日齡新生SD大鼠，雌雄不限，隨機(jī)分為5組，即對(duì)照組(A)、抗生素組(B)、益生菌組(C)、益生菌干預(yù)組(D)和生理鹽水組(E)，每組10只，后4組為模型組。B組：每天100mg/kg的頭孢克洛(?？虅?灌胃(用PH7.4的生理鹽水配制后為0.2ml/只)，1次/d，連續(xù)喂養(yǎng)2周；C組：長(zhǎng)雙歧桿菌灌胃(0.5億活菌/ml)，0.

2、2ml/只，1次/d，連續(xù)喂養(yǎng)2周；D組：先頭孢克洛0.2ml灌胃，2小時(shí)后再灌等量的長(zhǎng)雙歧桿菌0.2ml，共0.4ml/只，1次/d，連續(xù)2周；E組：每天灌以等量的生理鹽水(0.2ml/只)；A組：實(shí)驗(yàn)前不做處理就處死。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后每組隨機(jī)抽取8只采用斷頸法處死動(dòng)物，取少許新鮮盲腸內(nèi)容物糞便涂片；采用16SrRNA熒光PCR技術(shù)檢測(cè)盲腸內(nèi)容物中雙歧桿菌、乳酸桿菌、脆弱類桿菌及梭菌的相對(duì)含量；免疫組化方法檢測(cè)末端回腸腸組織中CD4、CD8

3、的表達(dá)。 結(jié)果: 1.腸道菌群的檢測(cè) 1.1糞便涂片結(jié)果顯示：對(duì)照組糞便中總細(xì)菌數(shù)量較少，革蘭氏陽(yáng)性桿菌占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，革蘭陰性桿菌數(shù)相對(duì)少，也有少量的革蘭陰性球菌和革蘭陽(yáng)性球菌，呈典型新生鼠菌群分布狀態(tài)。模型組與對(duì)照組相比，腸道細(xì)菌總數(shù)明顯增多，但每組腸道中各類菌群數(shù)占總細(xì)菌數(shù)比率有變化。結(jié)果顯示：抗生素組與其余四組相比G+b占腸道總細(xì)菌數(shù)比率明顯下降，G-b及G+c占總細(xì)菌數(shù)比率明顯升高差異有顯著性(P<0.01

4、)；益生菌干預(yù)組及生理鹽水組相對(duì)對(duì)照組、益生菌組G+b占總細(xì)菌數(shù)的比率下降，G-b占總細(xì)菌數(shù)的比率升高差異均有顯著性(P<0.01)；益生菌干預(yù)組與生理鹽水組之間、對(duì)照組與益生菌組之間各類菌群數(shù)占總細(xì)菌數(shù)比率差異均無(wú)顯著性；各組G-c的比率差異無(wú)顯著性。 1.2各組腸道中四種細(xì)菌相對(duì)含量的變化：抗生素組與益生菌組、生理鹽水組相比BB、LB含量降低，CL含量升高差異有顯著性(P<0.05)；益生菌干預(yù)組與抗生素組相比BB含量升高，

5、CL含量降低差異有顯著性(P＜0.05)；抗生素組與對(duì)照組相比CL含量升高，差異有顯著性(P＜0.05)；益生菌組、益生菌干預(yù)組、生理鹽水組與對(duì)照組相比BB含量升高，BF含量降低差異有顯著性(P＜0.05)；益生菌組相對(duì)益生菌干預(yù)組及生理鹽水組BB含量升高差異有顯著性(P＜0.05)；益生菌干預(yù)組與生理鹽水組相比四種細(xì)菌含量差異均無(wú)顯著性。 2.各組腸組織中CD4、CD8的表達(dá) 抗生素組與生理鹽水組、益生菌組及益生菌干預(yù)

6、組相比CD4、CD8表達(dá)受抑制，灰度值增大，差異有顯著性(P＜0.05)；益生菌組與生理鹽水組相比CD4、CD8表達(dá)增加，灰度值比較差異有顯著性(P＜0.05)；益生菌干預(yù)組與生理鹽水組相比CD4、CD8表達(dá)差異無(wú)顯著性；對(duì)照組除與抗生素組外，與其它三組相比CD4、CD8表達(dá)減少，差異有顯著性(P＜0.05)。 結(jié)論: 1.腸道菌群的正常定植，刺激腸道免疫系統(tǒng)的發(fā)育。 2.生命的早期使用抗生素(頭孢克洛)會(huì)減弱或