卡托普利逆轉(zhuǎn)SHR心、腦、腎微血管稀少及其對(duì)心、腦血管內(nèi)皮Bax、Bcl-2和腦內(nèi)VEGF、nNOS、BDNF表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討卡托普利降壓治療對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneouslyhypertensiverat，SHR)心、腦、腎微血管(毛細(xì)血管)減少是否具有逆轉(zhuǎn)作用，并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行初步探討。 方法：用單寧酸-氯化鐵組織化學(xué)媒染毛細(xì)血管的方法，分別灌注成年(5月齡)對(duì)照組自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)、經(jīng)卡托普利治療三個(gè)月的同月齡SHR組及同月齡正常血壓對(duì)照組大鼠(Wistar-KYOTO，WKY)，共3組，每組10只。分別取其心、腦、腎

2、經(jīng)冰凍切片，組織化學(xué)染色顯示毛細(xì)血管。另選上述大鼠3組，各組14只，常規(guī)灌注固定，行免疫組織化學(xué)染色(PV二步法)顯示心、腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞漿中凋亡調(diào)節(jié)基因Bax、Bcl-2的表達(dá)水平。最后對(duì)上述2種染色結(jié)果分別進(jìn)行光鏡觀察、攝像，采用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行血管密度及凋亡調(diào)節(jié)基因表達(dá)的半定量分析，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用單因素方差分析，組間比較采用t檢驗(yàn)。 結(jié)果：1微血管密度變化情況：(1)與對(duì)照組WKY組相比，成年(5月齡)SHR對(duì)照組腦

3、內(nèi)、腎皮質(zhì)、腎髓質(zhì)、心肌微血管的分布密度均明顯減少，單位面積內(nèi)微血管的面積密度分別為：大腦皮質(zhì)(5.85±0.69)％VS(4.15±1.12)％，腎皮質(zhì)(23.24±1.96)％VS(19.25±2.11)％，腎髓質(zhì)(19.23±1.57)％VS(l5.32±0.94)％，心肌(22.56±2.12)％VS(19.85±1.98)％，腎小球面積密度(19572±213μm2)VS(16328±157μm2)，各組間比較均為P＜0.01

4、；(2)與成年SHR對(duì)照組相比，卡托普利治療組SHR相應(yīng)部位微血管分布的密度均明顯增加，分別為大腦皮質(zhì)(4.15±1.12)％VS(5.64±0.72)％，腎皮質(zhì)(19.25±2.11)％VS(21.24±2.02)％，腎髓質(zhì)(15.32±0.94)％VS(20.15±1.32)％，心肌(19.85±1.98)％VS(21.65±1.97)％，腎小球面積密度(16328±157μm2)VS(19225±203μm2)，組間比較均為P＜0

5、.01；(3)同齡正常血壓大鼠(WKY)與卡托普利治療組SHR組比較各器官相應(yīng)部位微血管密度分布均無明顯變化，組間比較均為P＞0.05。 2凋亡調(diào)節(jié)基因Bax、bcl-2表達(dá)結(jié)果：(1)對(duì)照組成年SHR心、腦組織微血管內(nèi)皮細(xì)胞Bax表達(dá)程度明顯強(qiáng)于治療組成年SHR和對(duì)照組WKY，分別為：腦內(nèi)(148.4±3.21)VS(127.4±7.56)VS(76.32±9.12)，心內(nèi)(87.59±9.32)VS(64.89±3.47)V

6、S(51.45±4.78)，組間比較P＜0.01；(2)對(duì)照組SHR心、腦微血管內(nèi)皮bcl-2表達(dá)程度高于WKY組，但低于治療組，分別為：心內(nèi)(75.46±5.67)VS(101.5±16.06)VS(53.28±5.05)；腦內(nèi)(121.53±4.37)VS(134.75±9.88)VS(98.31±11.79)，組間比較P＜0.01；(3)各組心內(nèi)Bcl-2/Bax比值分別為：SHR對(duì)照組0.87±0.46，SHR治療組1.56±0

7、.97，WKY正常組1.07±0.73；腦內(nèi)Bcl-2/Bax比值分別為：SHR對(duì)照組0.83±0.61、SHR治療組1.06±0.92、WKY正常組1.29±1.06，各組間比較P＜0.01； 結(jié)論：1本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)三組大鼠多個(gè)器官毛細(xì)血管密度的觀察，進(jìn)一步證實(shí)成年高血壓大鼠存在著較普遍的微血管稀少現(xiàn)象。2通過卡托普利早期治療自發(fā)性高血壓大鼠，證明卡托普利在降壓的同時(shí)具有逆轉(zhuǎn)SHR微血管稀少的作用。3卡托普利逆轉(zhuǎn)微血管稀少的作用

8、是通過血管內(nèi)皮細(xì)胞漿中凋亡調(diào)節(jié)基因Bax、Bcl-2表達(dá)水平改變而介導(dǎo)的，即對(duì)照組SHR心、腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞中抑凋亡基因bcl-2的表達(dá)降低(相對(duì)正常對(duì)照組WKY輕度增高)，而促凋亡基因Bax表達(dá)水平增高(明顯高于正常對(duì)照組WKY)，二者比值降低，使內(nèi)皮細(xì)胞凋亡增多；而降壓治療后上述變化得到了逆轉(zhuǎn)。 目的：通過卡托普利治療SHR，觀察SHR降壓治療前、后腦組織nNOS、VEGF、BDNF表達(dá)變化，探討高血壓早期是否存在腦損害及卡

9、托普利降壓治療對(duì)腦損害是否具有保護(hù)作用。 方法：隨機(jī)選取2月齡的自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)28只、不分雌雄、隨機(jī)分為兩組，即高血壓對(duì)照組、高血壓治療組；另選正常血壓的日本京都Wistar大鼠(WKY)14只，作為正常血壓對(duì)照組。治療組SHR治療三個(gè)月后(其它兩組大鼠飼養(yǎng)相同時(shí)問、環(huán)境)，應(yīng)用免疫組化PV兩步法，分別觀察三組大鼠腦組織nNOS、VEGF、BDNF表達(dá)情況，并利用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行半定量分析，所得數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方

10、差分析，組間比較采用t檢驗(yàn)。 結(jié)果：1卡托普利治療對(duì)SHR降壓效果明顯，治療前與治療后血壓比較(P＜0.01=；2nNOS陽性細(xì)胞分布于大腦皮層、視上核、室旁核、孤束核、下丘腦、海馬、紋狀體等部位。3VEGF陽性細(xì)胞分布于大腦皮質(zhì)、紋狀體、室管膜以及脈絡(luò)叢等部位。4BDNF陽性細(xì)胞分布于海馬、大腦皮層、紋狀體、胼胝體等處。5治療組SHR腦內(nèi)nNOS、VEGF、BDNF表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)目及表達(dá)強(qiáng)度，均比未經(jīng)治療的對(duì)照組SHR下降(P

11、＜0.01)，治療組SHR和正常對(duì)照組WKY兩組比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 結(jié)論：隨著血壓的升高，成年SHR(對(duì)照組)腦內(nèi)nNOS、VEGF、BDNF蛋白表達(dá)水平上調(diào)，說明三種因子都與高血壓的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，并且在高血壓早期就存在對(duì)腦的不利影響(nNOS表達(dá)增強(qiáng)對(duì)神經(jīng)元具有毒性作用，而BDNF與VEGF表達(dá)增強(qiáng)據(jù)認(rèn)為是對(duì)腦損傷的代償反應(yīng))。經(jīng)卡托普利降壓治療后腦內(nèi)三種蛋白的表達(dá)均下調(diào)，接近正常，說明卡托普利降壓治療對(duì)靶器