魚藤魚藤根中魚藤素的分離與衍生研究.pdf

1、魚藤素是除魚藤酮之外植物中最常見的魚藤酮類化合物，魚藤素的實驗研究已證實在治療惡性腫瘤，尤其是肺部腫瘤方面具有顯著的抑制癌細胞增殖、改善癥狀等功效，且毒副作用極小。
　　 本課題選取魚藤的魚藤根為研究對象，旨在探索魚藤素提取、純化的最佳工藝；改進和優(yōu)化魚藤素的檢測手段；采用高速逆流色譜等新工藝新手段進一步提高魚藤素的提取率和純度，為以后進一步的藥理毒理研究提供材料，并對魚藤素分子進行穩(wěn)定性分析和還原研究。主要研究結(jié)果如下：

2、>　　 1．魚藤的提取條件優(yōu)化
　　 采用正交設(shè)計探討提取液，料液比，超聲處理時間，提取時間等因素對魚藤素提取含量的影響，尋找最佳的提取工藝。最終確定總黃酮提取的優(yōu)化工藝為：用30倍原料藥的氯仿和甲醇4：1混合溶劑作為提取溶劑，超聲波提取3次，每次超聲處理時間為500S。
　　 2．魚藤根總黃酮的HPLC分析條件優(yōu)化
　　 魚藤根提物中主要含有魚藤酮和魚藤素，兩者性質(zhì)極為相似難以分離和檢測，本方法優(yōu)化改進了魚藤

3、酮和魚藤素的HPLC檢測方法，流動相改為乙腈和水，洗脫方式為梯度洗脫，色譜條件：waters SunFire C18色譜柱(250mm×4．6mm，5μ m)、流動相為A(乙腈)和B(0．1％三氟乙酸)混合梯度洗脫：0—8minA(55％—65％)；8—11minA(65％—70％)；11—15minA(70％—90％)。流速為1mL/min、柱溫為25．0℃，進樣量為10μL。此方法較之傳統(tǒng)的檢測方法，有效避免了色譜峰的拖尾現(xiàn)象及兩種

4、物質(zhì)分離度低等問題，可以精確測定魚藤素的含量及純度。
　　 3．HSCCC分離條件優(yōu)化
　　 提取浸膏中主要成分為魚藤素和魚藤酮兩者性質(zhì)極為相近，采用傳統(tǒng)分離手段很難將其分離獲得魚藤素，采用高速逆流色譜技術(shù)以正己烷．乙酸乙酯．甲醇．水(體積比為7：0．5：5：3)為兩相溶劑系統(tǒng)，在主機轉(zhuǎn)850r/rain、流速2．0mL/min、檢測波長254nm條件下進行分離制備，可制備純度在95％以上的魚藤素。本方法分離時間短，分離

5、量大，樣品無損失，溶劑回收率高。
　　 4．確定魚藤素穩(wěn)定性
　　 魚藤素魚藤素耐光性較差，故應(yīng)避光保存。魚藤素有較強的耐熱性及耐超聲波性，長時間加熱及超聲處理均未使其結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。魚藤素具有良好的耐酸性，在堿性條件下魚藤素的分子結(jié)構(gòu)迅速發(fā)生改變。
　　 5．魚藤素還原條件優(yōu)化
　　 魚藤素可以被硼氫化鈉還原為羥基魚藤素，升高溫度有利于加速反應(yīng)進程，在超聲波作用下反應(yīng)時間大大縮短，適當增加超聲功率和減小超