大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的免疫調(diào)節(jié)作用及其對實驗性自身反應(yīng)性腦脊髓炎的影響.pdf

1、中山大學博士學位論文大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的免疫調(diào)節(jié)作用及其對實驗性自身反應(yīng)性腦脊髓炎的影響姓名：王敦敬申請學位級別：博士專業(yè)：神經(jīng)病學指導教師：胡學強20070602中山大學博士研究生畢業(yè)論文大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的免疫調(diào)節(jié)作用及其對EAE的影響炎衣原體感染多發(fā)性硬化的影響，以便為如何在多發(fā)性硬化患者中應(yīng)用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素提供依據(jù)。本課題研究內(nèi)容包括兩部分：第一部分：大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對脾細胞凋亡和增殖的作用；第二部分：大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對樹突狀細胞

2、分化、成熟的影響；第三部分：大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的免疫調(diào)節(jié)作用對實驗性自身免疫性腦脊髓炎的影響。第一部分：大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對脾細胞凋亡和增殖的作用目的：探討大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對培養(yǎng)脾細胞凋亡和增殖的作用，以闡明大環(huán)內(nèi)酯類抗生素在免疫調(diào)節(jié)中的作用。方法：從髓鞘堿性蛋白肽段6886(MBP6886)誘導的實驗性自身反應(yīng)性腦脊髓炎(EAE)Lewis大鼠中獲得脾細胞，然后在MBP6886和重組大鼠白細胞介素2(rRJL2)的共同刺激下進行培養(yǎng)。根據(jù)

3、干預方法的不同，把培養(yǎng)的脾細胞分為control組、阿齊霉素組(AM)以及克拉霉素組(CM)。在脾細胞的培養(yǎng)體系中加入不同濃度的阿齊霉素和克拉霉素，首先用AnnexinV測定凋亡試劑盒對在低濃度(≤10itg／m1)AM和CM中培養(yǎng)的脾細胞進行染色，然后應(yīng)用流式細胞儀測定細胞凋亡。在此基礎(chǔ)上，觀察10itg／mlAM和CM對增殖的作用，在10IIg／mlAM和CM中培養(yǎng)脾細胞24d時，在培養(yǎng)結(jié)束前6d時，加入3HTdR，應(yīng)用13閃爍儀測

4、定3HTdR的摻入率，以了解AM和CM對脾細胞增殖的作用。此外，還觀察了高濃度(100itg／m1)AM和CM對脾細胞凋亡的影響。結(jié)果：脾細胞在低濃度(≤10ite／m1)AM和CM中培養(yǎng)24d時，分別有3040％和2030％的發(fā)生早期凋亡，有2030％細胞為AnnexinV和PI雙陽性，與control組相比沒有顯著性差異(P005)，但是10updml的AM和CM可抑制脾細胞的增殖，抑制率達30％左右。高濃度(100lIg／m1)A