美索巴莫在健康志愿者體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)和生物等效性研究.pdf

1、美索巴莫是一種中樞性肌肉松弛劑，臨床上用于治療關(guān)節(jié)肌肉扭傷、腰肌勞損、坐骨神經(jīng)痛等病癥，也可用于增生性脊柱炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療。美索巴莫的療效與劑量關(guān)系很大，只有在血液中的濃度達(dá)到并維持在一定水平，才能有效發(fā)揮作用。美索巴莫的療效也取決于給藥時(shí)間，及時(shí)給藥療效較好。 在現(xiàn)代藥物代謝與藥物動(dòng)力學(xué)研究中，常用的體內(nèi)藥物分析方法有很多種，高效液相色譜法(HPLC)適用范圍廣，分離效率高，組分易回收，同時(shí)隨著檢測(cè)技術(shù)的

2、不斷更新和發(fā)展，使其成為現(xiàn)今最常用的檢測(cè)手段。 本研究根據(jù)分子有共軛雙鍵結(jié)構(gòu)在紫外區(qū)有吸收的特點(diǎn)，建立了用高效液相色譜-紫外法(HPLC-UV)測(cè)定人血漿美索巴莫濃度的方法。以丹東市通遠(yuǎn)藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的美索巴莫膠囊為受試制劑(T)，上海長(zhǎng)征富民藥業(yè)華中有限公司生產(chǎn)的高笑紅坐骨膠囊(美索巴莫膠囊)為參比制劑(R)，分別測(cè)定18名健康受試者口服受試制劑和參比制劑后血漿美索巴莫的濃度，繪制了血藥濃度-時(shí)間曲線。根據(jù)血藥濃度．時(shí)間數(shù)據(jù)

3、，采用梯形法計(jì)算曲線下面積(AUC)值；以半對(duì)數(shù)作圖法，由消除相末端的濃度點(diǎn)計(jì)算半衰期；求出主要的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)和受試制劑的相對(duì)生物利用度；將所得的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，評(píng)價(jià)生物等效性。為美索巴莫的安全、合理用藥提供科學(xué)的試驗(yàn)依據(jù)。 材料與方法: 1、檢測(cè)方法的確證(1)色譜條件色譜柱：Hypersil ODS2(150mm×4.6mm，51μm)；流動(dòng)相：0.05mol/L磷酸二氫鉀緩沖液(pH 4.6)-甲醇(69

4、:31，v/v)；流速：1.0 ml/min；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：274nm；柱溫：室溫。 (2)方法學(xué)考察方法專屬性；制備標(biāo)準(zhǔn)曲線；精密度試驗(yàn)；提取(絕對(duì))回收率試驗(yàn)；準(zhǔn)確度試驗(yàn)；樣品穩(wěn)定性試驗(yàn)(短期室溫穩(wěn)定性、長(zhǎng)期低溫穩(wěn)定性和冷凍一解凍穩(wěn)定性)。 2、試驗(yàn)方案 選擇健康男性志愿受試者18名。受試者年齡和體重相近。受試者無既往病史和藥物過敏史，精神狀態(tài)良好，平時(shí)很少服藥，不吸煙，無嗜酒，試驗(yàn)前兩周內(nèi)(14天內(nèi))未服用

5、任何藥物。試驗(yàn)前在中國(guó)醫(yī)大附屬一院接受全面體格檢查。于試驗(yàn)前讓受試者了解試驗(yàn)?zāi)康?、試?yàn)藥物的主要作用、可能發(fā)生的不良反應(yīng)和受試者的權(quán)益等，簽署知情同意書。 試驗(yàn)采用標(biāo)準(zhǔn)的雙處理、雙周期、兩序列2×2交叉設(shè)計(jì)。將18名健康男性受試者隨機(jī)分為兩組，每組9人，自身交叉服用受試制劑和參比制劑。即一組先口服受試制劑，再口服參比制劑，另一組先口服參比制劑再口服受試制劑。兩組交叉服藥間隔7天清洗期。于試驗(yàn)前一日晚21：00開始禁食，試驗(yàn)當(dāng)日晨

6、7：00空腹口服750mg美索巴莫受試制劑或參比制劑，以250ml溫開水送服。4小時(shí)和9小時(shí)后進(jìn)同樣飲食。于口服給藥后0、0.33、0.67、1.0、1.33、1.67、2.0、2.5、3.0、4.0、6.0、9.0和12.0小時(shí)分別從前臂正中靜脈抽血5.0ml，并立即移入經(jīng)肝素抗凝干燥的離心管中，靜置5min后，經(jīng)3000rpm離心10min，分離血漿，于-20℃冰箱中保存待測(cè)。 3、血藥濃度測(cè)定將受試者待測(cè)血漿樣品自冰箱中取

7、出，自然融化后取血漿200μl，依次加入20μg/ml的環(huán)丙沙星內(nèi)標(biāo)溶液25μl，蛋白沉淀劑10％三氯醋酸溶液120μl，渦旋1min，靜置30min，于10,000 rpm離心10min，吸取全部上清液經(jīng)0.22μm濾膜過濾。取濾液50μl進(jìn)樣到HPLC系統(tǒng)，進(jìn)行血漿樣品美索巴莫濃度的測(cè)定。 4、數(shù)據(jù)處理將血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)資料輸入計(jì)算機(jī)，采用中國(guó)藥理學(xué)會(huì)編制的3P97實(shí)用藥代動(dòng)力學(xué)程序軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)、相對(duì)生物利

8、用度的估算和生物等效性評(píng)價(jià)。 結(jié)論: (1)本研究建立了一種測(cè)定人血漿美索巴莫濃度的HPLC-UV法。該方法測(cè)定血漿美索巴莫濃度專屬性強(qiáng)，靈敏度高，準(zhǔn)確性好。該方法具有操作簡(jiǎn)便、成本低、精密度和回收率高等特點(diǎn)，可廣泛用于化學(xué)藥物分析和生物等效性的研究。 (2)測(cè)定了18名健康志愿者口服美索巴莫參比制劑和受試制劑后的血藥濃度，經(jīng)過藥動(dòng)學(xué)參數(shù)分析，發(fā)現(xiàn)美索巴莫受試制劑和參比制劑生物等效。研究結(jié)果提示丹東市通遠(yuǎn)藥業(yè)有限