PEDF緩解TNFα誘導(dǎo)草魚(yú)肝脂變性機(jī)理的初步研究.pdf

1、色素上皮細(xì)胞衍生因子(Pigment epithelium-derived factor，PEDF)是具有抑制血管增生，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)保護(hù)以及抗炎等多種功能的蛋白。對(duì)哺乳動(dòng)物的研究顯示PEDF直接參與調(diào)控脂質(zhì)代謝，但其在硬骨魚(yú)類上的作用并不明確。腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNFα)是機(jī)體內(nèi)重要的細(xì)胞因子，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞分化、增殖、凋亡等功能，并參與調(diào)節(jié)肝臟的脂肪變性過(guò)程。本研究首次克隆了草魚(yú)PEDF基因，

2、采用原核表達(dá)、免疫共沉淀、細(xì)胞培養(yǎng)和在體注射等手段，在細(xì)胞和個(gè)體水平上探討了PEDF的基本特性以及其對(duì)TNFα誘導(dǎo)的草魚(yú)肝脂變性的緩解作用與機(jī)制。獲得的主要研究結(jié)果如下:
　　1.PEDF由409個(gè)氨基酸組成，其DNA包含8個(gè)外顯子和7個(gè)內(nèi)含子。蛋白質(zhì)N端有一個(gè)信號(hào)肽，C端一個(gè)絲氨酸蛋白酶抑制劑結(jié)構(gòu)域。而細(xì)胞內(nèi)的PEDF定位于細(xì)胞質(zhì)，并能與甘油三酯水解酶(adipose triglyceride lipase，ATGL)結(jié)合。

3、r>　　2.PEDF參與營(yíng)養(yǎng)代謝的調(diào)控過(guò)程。PEDF有著廣泛的組織表達(dá)，并在脂肪組織中表達(dá)最高。其表達(dá)隨著脂肪細(xì)胞的分化成熟而增加。在體與離體饑餓試驗(yàn)顯示PEDF的表達(dá)均受到影響。油酸與胰島素離體處理肝細(xì)胞后，PEDF的表達(dá)顯著升高。
　　3.PEDF促進(jìn)甘油三酯降解。原核表達(dá)出有活性的PEDF重組蛋白，WB檢測(cè)顯示HIS標(biāo)簽標(biāo)記的外源性的PEDF能夠被細(xì)胞攝取，甘油三酯測(cè)定結(jié)果表明PEDF促進(jìn)甘油三酯降解。
　　4.PED