DEHP的遺傳素性和誘導(dǎo)哮喘發(fā)病機(jī)理的初步研究.pdf

1、進(jìn)入21世紀(jì)以來，伴隨著我國塑料工業(yè)的高速發(fā)展，增塑劑鄰苯二甲酸酯工業(yè)也在快速發(fā)展著，目前中國的年產(chǎn)量已經(jīng)超過日本，僅次于美國，名列世界第二位。更為重要的是我國鄰苯二甲酸酯消費量已經(jīng)超過美國，成為全球第一消費大國，我國居民體內(nèi)鄰苯二甲酸酯類化合物的負(fù)荷量正在快速增長。大量研究結(jié)果表明，鄰苯二甲酸酯類化合物可通過多種途徑進(jìn)入生物體內(nèi)產(chǎn)生毒性作用。鄰苯二甲酸二乙基己酯(di-(2-ethylhexyl)phthalatc，DEHP)，是目前

2、使用最為廣泛的一種鄰苯二甲酸酯類，在塑料工業(yè)中是最主要的增塑劑。關(guān)于DEHP毒性的研究是目前國際上環(huán)境醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的熱點和難題。本課題主要探討DEHP在誘發(fā)哮喘和哮喘發(fā)病機(jī)理方面的作用及遺傳毒性，這對全面和系統(tǒng)的了解DEHP毒性具有十分重要的意義。本研究以Wistar大鼠為研究對象，通過DEHP灌胃染毒建立DEHP誘導(dǎo)型大鼠哮喘模型檢測大鼠肺功能、嗜酸粒細(xì)胞數(shù)目和肺組織切片來探討DEHP誘發(fā)哮喘的發(fā)病機(jī)理同時用SDS-KCI實驗檢測DEHP

3、對大鼠肝細(xì)胞的遺傳毒性。研究結(jié)果如下： 1.DEHP致DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)效應(yīng) 在正常細(xì)胞中存在著一定量的DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)(DNA-protcin crosslinks，DPC)。這是DNA與核蛋白的正常聯(lián)系或其代謝的結(jié)果，對維持細(xì)胞的正?；顒泳哂兄匾饔?，當(dāng)有外來物理、化學(xué)因素作用時，則可誘導(dǎo)出過量的DPC。DPC與其他DNA損傷相比，較難修復(fù)，且DPC僅可發(fā)生在單鏈DNA上，這表明這種交聯(lián)只能發(fā)生在DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄期

4、間，因此DPC的形成，必將對DNA的構(gòu)象和功能(復(fù)制與轉(zhuǎn)錄)產(chǎn)生嚴(yán)重的影響，并在其復(fù)制過程中容易造成某些重要基因(如抑癌基因)的丟失，導(dǎo)致腫瘤或某些嚴(yán)重疾病的發(fā)生?？梢奃PC過度增加是一種病理現(xiàn)象，是DNA分子的一種嚴(yán)重的遺傳損傷。本研究以大鼠肝細(xì)胞為材料，采用SDS-KCI沉淀法對DEHP致DPC效應(yīng)進(jìn)行了研究。本研究證實了較高濃度的DEHP(70 mg·kg-1·d1-)可誘導(dǎo)大鼠肝細(xì)胞產(chǎn)生DPC。 2.DEHP誘導(dǎo)大鼠哮喘

5、的可能機(jī)理 哮喘是一種常見的慢性呼吸道疾病。WHO把哮喘定為終身性疾病，哮喘給世界各國帶來巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。近40年來，哮喘的發(fā)病率和死亡率在世界各地持續(xù)增長，而空氣污染物被懷疑是主要原因，但其誘發(fā)過敏性哮喘的分子機(jī)理不清楚，揭示哮喘的分子機(jī)理不但有重要理論意義，也有重要的社會意義。 流行病學(xué)研究表明DEHP可誘發(fā)人類的過敏癥狀甚而哮喘，然而Butala等的動物實驗表明DEHP本身并不是過敏原，經(jīng)DEHP暴露的小鼠體內(nèi)并沒

6、有檢測到DEHP特異性IgE。這提示我們DEHP可能通過其他的途徑誘導(dǎo)哮喘的發(fā)生，根據(jù)本課題組的理論研究和實驗研究，我們提出了“過敏體質(zhì)激發(fā)原”和“獲得性過敏體質(zhì)”假說，我們假設(shè)以DEHP為代表的鄰苯二甲酸酯在哮喘發(fā)生的過程中發(fā)揮的是“過敏體質(zhì)激發(fā)原”作用，其可能使機(jī)體總IgE升高，即形成“獲得性過敏體質(zhì)”，在遇到較低水平的過敏原時即能誘發(fā)哮喘。 本實驗研究結(jié)果顯示經(jīng)DEHP灌胃染毒的大鼠本身并不能引發(fā)哮喘，只有在灌胃染毒的同時