阿托伐他汀對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞和大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Adropin相關(guān)基因及蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、第一部分阿托伐他汀對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Adropin相關(guān)基因及蛋白表達(dá)的影響
　　目的：
　　探討阿托伐他汀對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical endothelial cell, HUVEC)Adropin相關(guān)基因及蛋白表達(dá)的影響。
　　方法：
　　將不同濃度的阿托伐他汀(0.002 umol/l、0.02 umol/l、0.2 umol/l、2 umol/l、20umol/l)與HUVEC共培養(yǎng)6

2、小時(shí)(hour,h)、12 h、24h。采用MTT法檢測(cè)HUVEC的增殖情況。半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)HUVEC Adropin mRNA的表達(dá)。ELISA法測(cè)定細(xì)胞上清液中Adropin蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.不同濃度的阿托伐他汀與HUVEC共培養(yǎng)6h時(shí),20 umol/l濃度組增殖活力明顯高于對(duì)照組(P<0.05),其他各濃度組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。共培養(yǎng)12h時(shí),0.02umol/l、0.2umol/l、2

3、umol/l、20umol/l濃度組細(xì)胞活力顯著高于對(duì)照組(P<0.05),0.2umol/l、2umol/l、20umol/l濃度組活力顯著高于0.002umol/l濃度組(P<0.05)。共培養(yǎng)24h時(shí),各濃度組細(xì)胞活力均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),0.02umol/l、0.2umol/l、2umol/l、20umol/l濃度組活力顯著高于0.002umol/l濃度組(P<0.05)。
　　同一濃度阿托伐他汀分別與HUVE

4、C共培養(yǎng)6h、12h、24h,12h和24h組活力明顯高于6h組(P<0.05)。
　　2.不同濃度組阿托伐他汀與HUVEC共培養(yǎng)6h、12h、24h后,Adropin mRNA的表達(dá)均顯著高于對(duì)照組(P<0.001),0.02umol/l、0.2umol/l、2umol/l、20umol/l濃度組Adropin mRNA的表達(dá)顯著高于0.002umol/l組(P<0.001)。同一濃度阿托伐他汀分別與HUVEC共培養(yǎng)6h、12h

5、、24h,12h和24h組mRNA表達(dá)量明顯高于6h組(P<0.01)。
　　3.不同濃度的阿托伐他汀與HUVEC分別共培養(yǎng)6h、12h、24h,各濃度組HUVEC上清中Adropin蛋白的表達(dá)顯著高于對(duì)照組(P<0.001),0.02umol/l、0.2umol/l、2umol/l、20umol/l濃度組Adropin蛋白的表達(dá)顯著高于0.002umol/l組(P<0.001)。
　　同一濃度阿托伐他汀分別與HUVEC共培

6、養(yǎng)6h、12h、24h時(shí),12h和24h組蛋白表達(dá)量明顯高于6h組(P<0.001)。
　　4. Adropin蛋白含量與HUVEC吸光度值(OD值)進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析顯示不同時(shí)間段各濃度組adropin與OD值呈顯著正相關(guān)(6h,相關(guān)系數(shù)r=0.471,P=0.049;12h,r=0.756,P=0.001;24h,r=0.725,P=0.001)。
　　結(jié)論：
　　1.阿托伐他汀能夠促進(jìn)HUVEC的增殖,

7、并呈劑量和時(shí)間依賴性。
　　2.阿托伐他汀能夠促進(jìn)HUVEC Adropin相關(guān)基因及蛋白的表達(dá),且呈劑量和時(shí)間依賴性。
　　3. HUVEC的增殖活力與其Adropin蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)。
　　第二部分阿托伐他汀對(duì)大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Adropin相關(guān)基因及蛋白表達(dá)的影響
　　目的：
　　探討阿托伐他汀對(duì)大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(rat aortic smooth muscle cell, RASMC)A

8、dropin相關(guān)基因及蛋白表達(dá)的影響。
　　方法：
　　原代培養(yǎng)SD大鼠的RASMC,免疫熒光和免疫細(xì)胞化學(xué)染色法進(jìn)行鑒定,取4-5代細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn)。.不同濃度的阿托伐他汀(0.02 umol/l、0.2 umol/l、2 umol/l、20umol/l)與RASMC分別共培養(yǎng)6h、12h、24h。采用MTT法檢測(cè)RASMC的增殖情況。半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)RASMC Adropin mRNA的表達(dá)。ELISA法測(cè)定細(xì)

9、胞上清液中Adropin蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.不同濃度的阿托伐他汀與RASMC共培養(yǎng)24h時(shí),各濃度組細(xì)胞活力顯著低于對(duì)照組(P<0.05),0.02umol/l、0.2umol/l阿托伐他汀組活力明顯高于20umol/組(P<0.05)。
　　同一濃度阿托伐他汀與RASMC共培養(yǎng)6h、12h、24h,12h和24h組活力明顯低于6h組(P<0.05)。
　　2.不同濃度的阿托伐他汀與RASMC共培養(yǎng)

10、,各濃度組Adropin mRNA表達(dá)量均高于對(duì)照組(P<0.05);隨著濃度增大,細(xì)胞中Adropin mRNA表達(dá)量逐漸降低(P<0.05)。
　　同一濃度阿托伐他汀分別與RASMC共培養(yǎng)6h、12h、24h,12h和24h組Adropin mRNA表達(dá)量明顯高于6h組(P<0.01)。
　　3.不同濃度的阿托伐他汀與RASMC分別共培養(yǎng)6h、12h、24h,各濃度組RASMC上清中Adropin蛋白的表達(dá)顯著高于對(duì)照組

11、(P<0.05)。隨著濃度增大,細(xì)胞中Adropin蛋白的表達(dá)量逐漸降低(P<0.05)。
　　同一濃度的阿托伐他汀分別與RASMC共培養(yǎng)6h、12h、24h,Adropin蛋白的表達(dá)量隨著時(shí)間延長(zhǎng)明顯增加(P<0.05)。
　　4. Adropin蛋白含量與RASMC吸光度值(OD值)進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析顯示不同時(shí)間段各濃度組 adropin與 OD值呈顯著正相關(guān)(6h,相關(guān)系數(shù) r=0.694, P=0.012)