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1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文BRD2核定位信號的核定位功能和細胞凋亡始動功能的初步研究姓名:何佳瑾申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):病理與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師:李桂源20070501何佳瑾碩士學(xué)位論文 中文摘要第一部分B R D 2 核定位信號的核定位功能1 .B R D 2 在不同細胞系中亞細胞定位模式B R D 2 是B R D 7 的一個交互作用蛋白,多方面的證據(jù)支持其功能與B R D 7 密切關(guān)聯(lián)。通過構(gòu)建含綠色熒光蛋白( G F P ) 標(biāo)簽的B
2、 R D 2真核表達載體p E G F P .C 3 /B R D 2 ,應(yīng)用G F P 介導(dǎo)的亞細胞定位方法,分別考察B R D 2 在C O S 7 、H e L a 和H N E l 三種細胞系中的亞細胞定位模式。結(jié)果表明B R D 2 在三種細胞系中均定位于細胞核,以片狀或點狀分布,相對均勻,沒有明顯的細胞種屬特異性。但發(fā)現(xiàn)在B R D 2轉(zhuǎn)染的C O S 7 、H e L a 和H N E l 中,許多細胞出現(xiàn)細胞核不規(guī)則、濃
3、縮、碎裂等細胞凋亡的現(xiàn)象,其中以C O S 7 和H e L a 細胞最為明顯,支持B R D 2 在上述細胞中具有細胞凋亡始動功能。2 .B R D 2 不同截短體的亞細胞定位模式應(yīng)用綠色熒光蛋白( G F P ) 介導(dǎo)的亞細胞定位方法,分別考察B R D 2 N 末端( a a 1 - 4 3 5 ) 和C 末端( a a 4 2 8 .7 9 8 ) 截短體在C O S 7 、H e L a 和H N E l 三種細胞系中的亞細胞
4、定位模式和差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn),B R D 2N 末端和C 末端均定位于細胞核,以片狀或點狀分布,相對均勻,沒有明顯的細胞種屬和類型特異性。同時發(fā)現(xiàn),在過表達B R D 2C .末端( a a4 2 8 .7 9 8 ) 的細胞中,出現(xiàn)細胞核不規(guī)則、濃縮、碎裂等凋亡現(xiàn)象的細胞明顯比過表達B R D 2 N 末端( a a 1 - 4 3 5 ) 的細胞多。3 . B R D 2 一個新的非典型核定位信號序列的分離與鑒定B R D 2 是一個核
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